生菌劑連續飼料添加投與對產氣莢膜桿菌

人工感染雞之效果

 

        由產氣莢膜桿菌(clostridium perfringens)在實驗感染上得知,其不僅能單獨使雞併發症壞死性腸炎(Necrotricentertis),且能與球蟲混合感染,增強、惡化球蟲症之病變或症狀,使死亡率變高。又同樣,在野外之養雞場,產氣莢膜桿菌與球蟲病之合併症,會給與養雞戶很大之經濟性蒙害,而成為大問題。

        因此,著者以生菌劑之商品名toyoserin;東洋釀造(株)製造了添加飼料給與中之雞,使人工感染產氣莢膜桿菌。調查感染後之腸內細菌叢與增體及飼料要求率,檢討生菌劑對雞之球蟲感染症的效果。茲報告其概要如下:

一、材料與方法

1.試驗實施期間:1988年11月∼1989年2月。

2.試驗實施場所:日本獸醫畜產大學。

3.供試生菌劑:toyoserin散(1g中含有109個Bacillus toyoi之胞子)。

4.感染菌及感染方法:利用導管(Katheter),每1隻雞胃內強制投與clostridium perfringens ATcc 13124 (型系A)株。

5.供試雞:導入80隻初生肉雞(avereca富大品種),預備飼育1週後,體重大約相等之6隻,供作試驗。

6.試驗區:如表1所示,設定3區。

表一    試                                   驗                                   區
供   試   生   菌    劑   給   與   量 供  試  隻  數
感染Toyoserin給與區 試驗期間中,飼料添加Toyoserin,使含有106個/g胞子,連續投與。 20
感染無投與對照區 20
非感染無投與對照區 20

7.供試飼料:加定量之生菌劑於日本配合飼料(株)之無添加抗菌性物質之飼料(SD肉雞前期用及SD肉雞後期用),作為生菌劑給與區之供試飼料。自預備飼育期間終了後之1週至4週齡,給與SD肉雞前期用飼料:自4週齡至6週齡,給與SD肉雞後期用飼料。

預備飼育期間,供試前記之SD肉雞前期用飼料。

8.試驗方法:如圖1所示,在感染之後、感染後1週(3週齡)、2週(4週齡)及4週(6週齡)、各區剖檢5隻。

 

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9.檢查項目:實施下記之檢查項目

亦即在感染後之1週齡、2週齡、3週齡、4週齡、5週齡及6週齡各別實施體重測定。測定體重時也實施飼料攝取量之測定。剖檢所見為主要觀察2週齡、3週齡、4週齡及6週齡之小腸、大腸及肝臟之肉眼病變。菌分離為在剖檢時自十二指腸及盲腸,遵照光岡氏之方法,分離產氣莢膜桿菌、乳酸菌、大腸菌、沙門氏菌及camphylobacter。

二、試驗成績

1.飼養試驗成績

        各區之體重推移如圖2,各時期之增體量及飼料要求率如表2所示。生菌劑給與區之增體量及飼料要求率,在感染後第1週雖有略遜於非感染對照區之趨向,但此後有同於非感染對照區或略較優之推移。

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表二 各   週    齡   之   增   體   量    及   飼   料   要   求    率
檢查期間 檢查隻數 區檢查項目   toyoserin  給    與     區 感 染  無 投與 對  照 區 非 感  染 無投與對照區
1∼2週齡 20 增體(g,日)±標準偏差 219 (105)±25.8 210.2 (100)±19.2 207.8 (100)±22.4
飼料要求率 1.23 (95) 1.28 (99) 1.29 (100)
2∼3週齡 15 增體(g,日)±標準偏差 286 (98)±29.8 273.3 (94)±47.3 297 (100)±32.2
飼料要求率 1.56 (102) 1.64 (108) 1.52 (100)
3∼4週齡 10 增體(g,日)±標準偏差 365 (102)±31.9 348 (97)±60.2 358 (100)±57.3
飼料要求率 1.77 (99) 1.84 (103) 1.78 (100)
4∼5週齡 5 增體(g,日)±標準偏差 371 (103)±56.4 371 (97)±52.7 382 (100)±51.9
飼料要求率 2.06 (99) 2.15 (103) 2.09 (100)
5∼6週齡 5 增體(g,日)±標準偏差 460 (102)±46.8 435 (96)±30.8 451 (100)±38.3
飼料要求率 2.30 (98) 2.47 (105) 2.35 (100)

註:(  )內為以非感染無投與對照區為100時之指數。

        感染無投與對照區,自感染後至試驗終了迄止之增體量及飼料要求率,均有較劣於其他兩區之趨向。

        又如表3所示,至試驗終了迄止,就無剖檢之各區5隻,自2週齡至6週齡,實施增體量之統計學的檢討(Student之T檢定),感染對照區與其他兩區相較,有1%危險率之顯著差異。

表三  同   一    個   體   (  各  區  5  隻   )   之   體   重   及   增    體   量
檢查項目 檢查時期 toyoserin給與區 感染無投與對照區 非感無投與對照區
體        重 2 週   齡

6 週   齡

380±22.2(1)

1,897±132.5

362±34.4

1,812±109.4

365±40.2

1,843±196.7

增  體  量 2∼6週齡 1,517±119.1 1,450±101.4** 1,478±162.2
**與toyoserin給與區及非感染無投與對照區相較有顯著差(P<0.01)。

(1):平均值±標準偏差。

2.細菌學之檢查成績

        在各檢查時期,自各區之十二指腸及盲腸,分離之細菌推移如表4所示。

表四  在   各    檢   查   時   期   之    十   二   指   腸   及    盲   腸   分   離   細    菌   之   推   移
分   離   菌 週                                                                                                                齡
2 3 4 6
十二指腸 盲        腸 十二指腸 盲        腸 十二指腸 盲        腸 十二指腸 盲        腸
toyoserin給與區 Lactobacillus E. coli Cl. perfringens 6.97±0.56a(5/5)b

3.55±0.35(5/5)

4.20±0.69(3/5)

8.27±0.90(5/5)

6.76±0.47(5/5)

     3.60     (1/5)

4.97±0.73(5/5)

4.22±1.05(4/5)

     3.88     (1/5)

7.23±1.04(5/5)

6.32±0.67(5/5)

3.70±0.75(3/5)

7.02±0.43(5/5)

3.48±0.66(4/5)

       NF       (0/5)

8.65±0.55(5/5)

5.44±0.54(5/5)

       NF       (0/5)

7.94±0.73(5/5)

3.71±0.40(5/5)

       NF       (0/5)

8.73±0.53(5/5)

5.07±0.99(5/5)

       NF       (0/5)

感    染無投與對照區 Lactobacillus E. coli Cl. perfringens 6.01±0.86(5/5)

3.55±0.59(4/5)

4.18±0.44(3/5)

8.11±0.92(5/5)

6.52±0.67(5/5)

4.54±0.85(3/5)

3.78±0.54(5/5)

5.16±1.24(5/5)

4.88±0.85(4/5)

5.85±0.90(5/5)

7.55±0.68(5/5)

7.14±1.40(4/5)

6.59±0.69(5/5)

3.72±1.15(5/5)

4.75±0.61(4/5)

7.25±0.54(5/5)

6.78±1.12(5/5)

6.20±1.39(4/5)

5.64±0.77(5/5)

5.06±0.61(5/5)

      3.22      (2/5)

6.73±0.92(5/5)

7.22±0.78(5/5)

4.03±0.67(3/5)

非感染無投與對照區 Lactobacillus E. coli Cl. perfringens 6.34±1.71(5/5)

3.54±0.51(4/5)

NF(0/5)

7.59±0.87(5/5)

6.18±0.87(5/5)

NF(0/5)

6.64±0.70(5/5)

3.96±1.12(4/5)

NF(0/5)

8.30±1.20(5/5)

6.59±0.91(5/5)

NF(0/5)

6.11±0.60(4/5)

8.48±0.28(4/5)

NF(0/5)

8.64±0.26(5/5)

5.88±0.81(5/5)

NF(0/5)

8.07±0.30(5/5)

5.13±0.92(5/5)

NF(0/5)

8.84±0.19(5/5)

6.04±0.71(5/5)

NF(0/5)

(a):平均值(對數表示)±標準偏差。

(b):分離隻數/檢查隻數

NF:clostridium perfringens 102/g以下,其他菌103/g以下。

        生菌劑給與區,在感染之後及感染後第1週,自十二指腸及盲腸分離少數例之產氣莢膜桿菌。又同時發現乳酸菌減少及大腸菌上昇。但自感染後第2週,不能分離出接種之產氣莢膜桿菌,且可見乳酸菌增加及大腸菌減少之趨向。

        感染無投與對照區,在感染之後,自十二指腸及盲腸中,5例中有3例可分離出平均104個/ml之產氣莢膜桿菌。在感染後第一週,自5例中之4例可分離出,其菌數在十二指腸平均105個/ml、在盲腸有107個/ml,較高。此後,分離菌數漸減,在感染後第4週,自5例中之3例可分離出。又感染後第1週,在十二指腸及盲腸可發現顯著的乳酸菌減少及大腸菌上昇,此後,乳酸菌菌數有明顯較低於toyserin給與區,而大腸菌數卻較高之趨向。

        又自所檢查之雞,並不能分離出沙門氏菌及Camphylobacter。

3.剖   檢

        在各檢查時期,所剖檢之雞的小腸、大腸及肝臟,以肉眼檢查時,除2、3之個體散見肝之充鬱血外,並不見異常,各試驗區沒有差異。

三、考   察

        在使感染產氣莢膜桿菌之無投與對照區,於感染後第1週,自十二指腸及盲腸,可以常常分離出產氣莢膜桿菌,且同時發現乳酸菌減少及大腸菌增強,在感染後第4週,盲腸中5例有3例有分離出產氣莢膜桿菌。

        另外,生菌劑給與區,在感染後第1週,5例中之3例可分離出產氣莢膜桿菌,同時發現乳酸菌減少。但第2週以後,卻不能分離出產氣莢膜桿菌,而且也發現乳酸菌減少。但第2週以後,卻不能分離出產氣莢膜桿菌,而且也發現乳酸菌上昇及大腸菌減少的現象。

        此點意味:生產菌可排除侵入消化管內之產氣莢膜桿菌,同時可增殖乳酸菌等之有用菌,使恢復正常之腸內菌叢平衡。且在增體及飼料要求率方面,感染後第1週之toyoserin給與區,雖有略遜於非感染對照區之趨向,但此後,有同於或稍較優於非感染對照區之推移。可見因產氣莢膜桿菌投與而誘致之腸內菌叢變亂,可賴toyoserin之給與使恢復正常,消化吸收也因此變好。

        產氣莢膜桿菌為健康雞之腸內正常細菌叢形成菌之一。一般而言,在盲腸內檢出不超過101~2個/g程度,但依感染Eimeria tenella或Eimerea brnnetti等之球蟲,腸內細菌叢變亂,由於產氣莢膜桿菌異常增殖,再度刺激因球虫感染,受障礙之腸管粘膜組織則增強其光症,使症狀更加嚴重。又使用磺胺劑治療球蟲症後也會有發生壞死性腸炎之事。這點是由於投與磺胺劑使腸內細菌叢發生變化,而常發生產氣莢膜桿菌異常增殖之結果。這種產氣莢膜桿菌之增殖,發現與球蟲病之發症及症狀有密切關係。

        賴本次之實驗感染試驗得以發現,toyoserin對雞之連續飼料添加給與有抑制產氣莢膜桿菌增殖之現象,可見toyoserin在野外,也能有效預防發生腸內細菌對變化之球蟲感染症的發症或減輕其症狀。由這啟示,有助於提高野外之肉雞生產性。

 

(譯自1989年11月號畜產之研究)

飼料營養雜誌(72~79)-陳厚基.九一年五期

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