技術服務資料－測定賽得福(Ceftiofur)及其它12種抗生素對引起豬呼吸道病變細菌之最低制菌濃度
摘 要
本實驗主要在測定賽得福鈉(Ceftiofur Sodium)及其它12種具競爭性抗生物質(ampicillin penicillin G，gentamicin，sulfamethazine，tetracycline，erythromycin，tylosin，streptomvcin，Ciprofloxacin，enrofloxacin，lincomycin，and pirlimycin)，對分屬3屬、6種之31株病原菌的最低制菌濃度(Minimal inhibitory concentration, MIC)。這些菌株乃由未經投藥處理之病畜所分離出，以評估投與賽得福(Ceftiofur)後，後豬呼吸道疾病之防治效果。
結果以賽得福(Ceftiofur)及其它β-丙醯胺類化合物(β-lactam Compounds)對鏈球菌屬(Streptococci)之制菌效果最佳(MIC50＝≦.06μg／ml)，而賽得福(Ceftiofur)之效果又於同屬𣿅杄類化合物(Quinolone)的Ciprofloxcin及enrofloxacin(MIC50＝0.13－0.5μg／ml，依菌株而異)。百果黴素(Pirlimycin)對此類革蘭氏陽性菌G(＋)的制菌效果則次之(MIC50＝≦.06－0.25μg／ml，依菌株而異)。而streptomycin、Sulfamethaxime、tetracycline、Erythromycin及tylosin等行之多年的抗生素則對這些分離出來的鏈球菌屬已普遍具有耐藥性，故制菌效果平平。在控制敗血性巴斯德桿菌(Pasteurella multocida)A型及D型上，賽得福(Ceftiofur)、ciprofloxacin、enrofloxacin仍是13種試驗藥品中效果最佳者(MIC90＝＜.06μg／mla，而strepomycin、sulfamethazine、tetracydine及tylosin仍因耐藥性問題，致效果不顯著。lincosamides則如原先所預料，對同屬革蘭式陰性菌的巴斯德桿菌(Pasturella)及博德氏菌屬(Bordetella spp.)。僅𣿅杄類抗生素(quinolones)、Gentamicin及tetracycline對B. brochiseptica的二種菌株有制菌效果。
依此結果，再綜合以往所做有關防治放射桿菌性胸膜肺炎(Actinobacillus pleuropeumoniae)之抗生素活性測定試驗，可知，賽得福(Ceftiofur)對各類會引起豬呼吸道疾病之病原菌有相當好的制菌效果。
介 紹
賽得福鈉鹽(Ceftiofur Sodium)是一種具廣效抗菌譜的頭孢子素類抗生素(Cephalosporin antibiotic)，在獸醫學上，已被證實對許多好氣性菌及厭氣性菌有相當理想的制菌效果(1)；最近，此類抗生素開始被推廣於防治豬的呼吸道疾病上，目前已在世界各地進行研究，以評估賽得福(Ceftiofur)對自然感染的豬呼吸道疾病之療效(2)，這些試驗用菌株，乃由愛荷華州立大學病理診斷實驗室，在未經投藥處理病畜之肺及氣管組織中所分離出，然後於普強公司實驗室進行MIC值測定。本實驗所使用的試藥，均是市場上相當重要的競爭產品。
材料和方法
試 藥：
Ceftiofur Sodium
Ampicillin Sodium
Penicillin G Sodium
Gentamycin Sulfate
Sulfamethazine
Tetracycline hydrochloride
Erythromycin
Streptomycin Sulfate
TylosineTartrate
Ciprofloxacin hydrochloride
monohydrate
Enrofloxacin
Lincomycin hydrochloride
Pirlimycin hydrochloride
所有試藥均溶解並稀釋於無菌水中。濃度均以自由基或酸當量活性(acid equivalent activity)之型態表示。
步 驟：
本實驗步驟乃依前述之瓊脂稀釋法(Agar dilution method)以測定最低制菌濃度(MIC)(4)。
菌 株：
試驗的菌株及其來源如表一。這些菌株乃在愛荷華州立大學病理診療實驗室，由勞倫、赫夫曼博士(Dr. Lorraine Hoffman)指導下，將未經投藥處理豬群於被飼養的第七天解剖，由其肺及氣管組織中分離出(2)。這些將作為測定MIC值用之菌株，則如以往之方法分別予以保存及接種(1)。
| 表一 菌 株 及 其 來 源 | |||
菌 株 |
豬 隻 | 來 源 | 鑑 定 |
| S89-1 S89-2 S89-3 S89-4 S89-7a S89-9 S89-10 S89-11 S89-12 S89-13 S89-14 S89-15 S89-16 S89-17 S89-17(2) S89-18 S89-19 S89-20 S89-21 S89-23 S89-25 S89-26 S89-29 S89-30 S89-31 S89-32 S89-33 S89-34 S89-35 S89-36 S89-37 |
149 120 159 61 109 54 98 149 121 3 35 7 125 121 3 64 96 1 94 33 47 4 58 150 136 105 4 150 25 87 25 |
Yeske (11794) Yeske (11794) Yeske (11794) Yeske (11794) Graham (12138) Waddell (13933) Waddell (13933) Waddell (13933) Waddell (13933) Waddell (13933) Waddell (13933) Waddell (13933) Waddell (13933) Waddell (13933) Waddell (13933) Kueker (15143) Kueker (15143) Kueker (15143) Kueker (15143) Kueker (15143) Kueker (15143) Yeske (16322) Yeske (16322) Yeske (16322) Yeske (16322) Yeske (16322) Yeske (16322) Yeske (16322) Yeske (16322) Yeske (16322) Yeske (16322) |
Streptococcussuis* S. suis 1,2 α-streptococcus S. suis 4 Pasteurella multocida A S. suis* S. suis* P. multocida D P. multocida D S. suis 8 Bordetella bronchiseptica S. equisimilis S. equisimilis S. uberis B. bronchiseptica P. multocida A P. multocida A P. multocida A P. multocida A P. multocida A P. multocida A S. suis* S. equisimilis S. equisimilis S. equisimilis S. equisimilis S. equisimilis S. suis P. multocida A P. multocida A S. equisimilis |
| *類型未確認。 a.菌株所編乃連續號碼，但有部分因菌株無法生長或受嚴重污染，無法使用，而未予編列。 |
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結果與討論
賽得福(Ceftiofur)及其它12種具競爭性抗生素對自豬所分離出呼吸道疾病之細菌性病原所作的最低制菌濃度(MIC)試驗結果，概述於表2及表3。各試藥對個別菌株之MIC值則列於表4及表5。
| 表二 抗 生 素 對 鏈 球 菌 屬 菌 株 之 最 低 制 菌 濃 度 (MIC，μg／ml) | ||||||
| 抗 生 素 | S. suis (8) | S. equisimilis (8) | 其他菌種(2) | |||
| 範 圍 | MIC50a | 範 圍 | MIC50 | 範 圍 | MIC50 | |
| Ceftiofur Ampicillin Penicillin Gentamicin Streptomycin Sulfamethazine Tetracycline Erythromycin Tylosin Ciprofloxacin Enrofloxacin Lincomycin Pirlimycin |
.06b ≦.06－.25 ≦.06－.5 .25－1 .25－＞128 64－256 8－＞128 ≦.06－＞128 ≦.06－＞128 .25－2 .13－5 .13－16 ≦.06－.25 |
≦.06 ≦.06 ≦.06 .25 8 128 16 .13 1 .5 .5 2 .25 |
≦.06 ≦.06 ≦.06 1 64 128 16 ≦.06－4 ≦.06－＞128 ≦.06－.13 .13－.5 .13－2 ≦.06－.25 |
≦.06 ≦.06 ≦.06 1 64 128 16 ≦.06 8 .13 .25 .5 ≦.06 |
≦.06 ≦.06 ≦.06－.25 .5－1 8－16 256 2－32 ≦.06－.25 ＞128 .13 .25－5 2－16 ≦.06－.25 |
… C |
| 表三 各種抗生素對革蘭式陽性菌菌株之最低制菌濃度(μg／ml) | ||||
| 抗 生 素 | P. multocida (11) | B. bronchiseptica (2) | ||
| 範 圍 | MIC90a | 範 圍 | MIC90 | |
| Ceftiofur Ampicillin Penicillin Gentamicin Streptomycin Sulfamethazine Tetracycline Erythromycin Tylosin Ciprofloxacin Enrofloxacin Lincomycin Pirlimycin |
≦.06－.5 .13－5 ≦.06－.5 ≦.06－1 .25－128 8－256 .25－16 .25－2 16－32 ≦.06b ≦.06 .25－16 ≦.06－32 |
≦.06 .25 ≦.06 1 16 256 16 2 32 ≦.06 ≦.06 16 32 |
128 4－32 128 2 ＞128 ＞512 .5 8－16 ＞128 .25－1 .25－1 4－64 1－＞128 |
… C |
| 註：a.在最低制菌濃度內被有效抑制的菌株比例。 b.在「範圍」一欄內若只有一個數字，表示所有的菌株皆在此一濃度下被有效抑制。 c.試驗菌株過少，數據不予採用。 |
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| 表四 賽 得 福 (Ceftiofur) 與 其 它 抗 生 素 ， 對 各 鏈 球 菌 株 之 最 低 制 菌 濃 度 (MIC) 比 較 | |||||||||||||
| 菌 株 | 各 試 藥 之 最 低 制 菌 濃 度 ( MIC ( μg ／ ml ) | ||||||||||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | |
| S89-1a S89-2a S89-4a S89-9a S89-10a S89-13a S89-26a S89-34a S89-15b S89-16b S89-29b S89-30b S89-31b S89-32b S89-33b S89-37b S89-3c S89-17d |
≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 |
≦.06 ≦.06 ≦.06 .25 .25 .25 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 |
≦.06 ≦.06 ≦.06 .25 .5 .13 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 .25 ≦.06 |
.25 .25 1 .25 .25 .13 .25 .5 1 1 1 1 1 1 1 1 .5 1 |
64 8 8 8 8 2 .25 ＞128 64 64 64 64 64 64 64 64 8 16 |
128 128 128 128 128 256 64 256 128 128 128 128 128 128 128 128 256 256 |
16 16 16 128 ＞128 ＞128 8 128 16 16 16 16 16 16 16 16 2 32 |
≦.06 ≦.06 ≦.06 .13 .25 .13 .13 ＞128 4 4 ≦.06 4 2 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 .25 |
≦.06 ≦.06 32 .1 1 2 ≦.06 ＞128 ＞128 ＞128 8 ＞128 64 .25 .25 ≦.06 ＞128 ＞128 |
.25 .25 .25 2 2 2 1 .5 ≦.06 .13 .13 .13 .13 .13 .13 .13 .13 .13 |
.13 .13 .13 .5 .5 .5 .5 .5 .13 .25 .25 .5 .25 .5 .25 .13 .25 .5 |
4 .13 2 2 2 2 16 2 .25 2 1 2 2 .13 .13 .5 16 2 |
.25 ≦.06 .25 .13 .25 .25 .25 .25 ≦.06 .25 ≦.06 .25 .25 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 .25 |
| 1：ceftiofur；2：ampicillin；3：penicillin；4：gentamicin；5：streptomycin；6：sulfamethazine；7：tetracycline；8：erythromycin；9：tylosin；10：ciprofloxacin；11：enrofloxacin；12：lincomycin；13：pirlimycin. a. S. suis b. S. equisimilis c. astreptococcus d. S. uberis |
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| 表五 賽 得 福 (Ceftiofur) 與 其 它 抗 生 素 ， 對 格 蘭 氏 陰 性 菌 菌 株 之 最 低 制 菌 濃 度 (MIC) 比 較 | |||||||||||||
| Strain | 各 試 藥 之 最 低 制 菌 濃 度 ( MIC ( μg ／ ml ) | ||||||||||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | |
| S89-7a S89-11a S89-12a S89-18a S89-19a S89-20a S89-21a S89-23a S89-25a S89-35a S89-36a S89-14b S89-17b |
≦.06 ≦.06 .5 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 128 ＞128 |
.13 .13 .5 .13 .13 .13 .25 .25 .25 .25 .25 32 4 |
≦.06 ≦.06 .5 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 128 128 |
5 .25 ≦.06 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 |
8 8 128 .25 16 16 16 16 16 ＞128 6 128 ＞128 |
64 32 8 64 256 256 256 256 256 256 256 ＞512 ＞512 |
.6 .25 8 .5 16 16 16 16 16 8 1 .5 .5 |
2 2 .25 .25 2 2 2 2 2 2 2 16 8 |
16 16 8 16 16 16 16 16 16 32 32 ＞128 ＞128 |
≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 1 .25 |
≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 ≦.06 1 .25 |
.25 .5 2 .25 .25 .25 16 16 16 16 16 64 4 |
.13 .5 10 .5 .13 ≦.06 32 32 32 32 32 ＞128 1 |
| 1：ceftiofur；2：ampicillin；3：penicillin；4：gentamicin；5：streptomycin；6：sulfamethazine；7：tetracycline；8：erythromycin；9：tylosin；10：ciprofloxacin；11：enrofloxacin；12：lincomycin；13：pirlimycin. a. P. multocida b. B. bronchiseptica |
|||||||||||||
由表可知，賽得福及其他β－內鹽胺類化合物對鏈球菌屬之制菌效果最佳，而賽得福(Ceftiofur)之效果又優於同屬𣿅杄類化合物(quinolone)的ciprofloxacin及enrofloxacin。百里黴素(Pirlimycin)對此類革蘭式陽性菌的制菌效果則次之。而Streptomycin、Sulfamethazine、tetracycline及tylosin等行之多年的抗生素、則因對鏈球菌屬已普遍具有耐藥性，致制菌效果平平。在控制敗血性巴氏桿菌(Pasteurella multocida)A型及D型上，賽得福(Ceftiofur)、ciprofloxacin及enrofloxacin是 13種試驗藥品中效果最佳者。而treptomycin、Sulfamethazine、tetracycline及tylosine仍亦因耐藥性問題，致效果不顯著。lincosamides則如原先所預料，對同屬革蘭氏陰性菌的巴氏桿菌屬(Pasturella)及博德氏菌屬(Bordetela spp.)無效，僅𣿅杄類抗生素(quinolones)、Gentamicin及tetracycline對B. bronchiseptica的兩種菌株有效果。
依本文結果，再綜合以往所做有關防治放射桿菌性胸膜肺炎(Actinobacillus pleuropneumoniae)用抗生素活性測定試驗結果，可知，賽得福(Ceftiofur)對各種引起豬呼吸道疾病之病原菌有相當好的制菌效果，此已由近期對1762頭豬隻所作的實驗中得到證明(2)。
參考文獻
1.Yancey, RJ Jr, MLKinney, BJRoberts, KRGoodenough,JCHamel, and CWFord. 1987. Ceftiofur sodium, a broad-spectrum cephalosporin:evaluation in vitro and in vivo in mice. Am. J. Vet. Res. 48:1050-1053.
2.Luchsinger, JH, JBPaulissen, and KJDame, 1989. Effect of ceftiofur sodium sterile powder for treatment of naturally occurring swine respiratory disease. Upjohn Technical Report# 796-9690-89-001.
3.IOM, RAEvans to RJYancey entitled " MIC comparisons", dated 8 August, 1989.
4.Klien, LK, KRGoodenough, BJKoberts, and RJYancey, Jr. 1985. ln vitro and in vivo evaluation of habekacin against veterinary bacterial pathogens. Upjohn Technical Report # 705-7922-85-012.
飼料營養雜誌(60~67)－普強藥廠．九一年九期
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