飼料之色胺酸對肉雞成長及對做飼料蛋白質水準媒介之脂肪代謝的影響

作3次試驗，以確定飼料蛋白質及色氨酸，如何影響成長肉雞之脂肪代謝，利用一種稀釋法(玉米－玉米筋粉明膠Summit／玉米澱粉基本飼料)於三種因素試驗。在第一試驗，給與各種不同之蛋白質及色氨酸水準：自16～28％蛋白質及自蛋白質之0.34～2.74％色氨酸。

對20、24及28％飼料蛋白質，當飼料之色氨酸水準：各別為蛋白質之0.83±0.03，0.77±0.05及0.78±0.05％時，使增重達最大。對飼料效率及增重之估計需求量為一樣。在每一種蛋白質水準，當飼料之色氨酸水準增加時，肝脂肪顯著(P＜0.0001)降低，飼料之色氨酸，沒有顯著改變雞之總血漿脂肪之濃度或屠體脂肪含量(P＞0.2399)，色氨酸輔助顯著增加血漿亞麻仁油酸及血漿游離色氨酸濃度。

對成長雞估計色氨酸需求量，為飼料蛋白質之0.80±0.01％，增加肝脂肪及降低血漿色氨酸，為顯示色氨酸缺乏之診斷傷害。

很多研究者不顧蛋白質水準，研究肉雞之色氨酸需求量，Freeman (1979)估計色氨酸需求量，沒有考慮及各種不同之飼料蛋白質水準，據Griminger (1956)之報告，飼料之蛋白質沒有直線的增加雞之色氨酸需求量，但，Boomgaardt及Baker (1971)報告，隨粗蛋白質之增加，而色氨酸需求量直線增加，他們估計，對增重，色氨酸對粗蛋白質比之需求量為0.87％，對飼料效率為0.85％，很多報告曾指出，雞對氨基酸需求量，最好以飼料之粗蛋白質的直接比例表示(克胺基酸／g粗蛋白質，1952 Almquist；1970 Fisher及Morris；1971、1973 Boomgaardt及Baker；1985 Gous及Morris；1987 Morris)，最近之合成的色氨酸有效性，重新有趣於確定色氨酸對肉雞飼料之最適水準。

過量之色氨酸，曾顯示會增加絕食鼠之肝脂肪(1967 Hirata；1973 Sakurai；1980 Rao)，Rao證實鼠注入色氨酸，會引起血漿游離脂肪酸增加，與血漿膽固醇降低，但沒有發現三醯基甘油成磷脂之變化，據Kohls (1987)報告，沒有由於人類之色氨酸處理，血漿脂肪水準變化，Akiba (1988)報告，當缺乏色氨酸產蛋雞，輔助色氨酸時，肝脂肪水準降低。

作本試驗以確認肉雞之色氨酸需求量與飼料之粗蛋白質含量成比例，也確定色氨酸水準對脂肪蓄積及輪廓之效果。

得自商業性孵化場之公肉雞，飼養於溫度控制育雛器，持續供給光線、飲水及飼料，首7天供試雞給與NRC (1984)推薦所有養分需求量之玉米－黃豆粉基本飼料，在第8天，自個別重小組，逢機分配供試雞處理，以便供給同樣之欄平均數及變異數。試驗1為每一處理重複3次，試驗2及3為每一處理重複4次，在每一試驗係利用5隻之重複。

試驗飼料係混合基本及Summcit飼料，並添加結晶之L－色氨酸，供給各種不同粗蛋白質水準及色氨酸水準。試驗1係利用4種粗蛋白質水準(16、20、24及28％)及6種色氨酸對粗蛋白質比(0.34、0.64、0.94、1.24、1.54及1.84g／100g CP之因素設計。

作第2次試驗，測定色氨酸毒性是否為估計最大反應尖峰之問題，添加近需求量點於試驗3，試驗2有2×9因素設計(16及28％粗蛋白質，及每100g蛋白質中，最初的6種色氨酸對蛋白質比，加上2.14，2.44及2.74g色氨酸)，試驗3有2×6因素設計(16％及28％粗蛋白質及每100g粗蛋白質中有0.625，0.75，0.875，1.00及1.125g色氨酸)，自粗蛋白質及色氨酸之分析值，調製試驗3之飼料，配合試驗1及2。表2之報告結果為，依據見於飼料之色氨酸及粗蛋白質水準。

表一飼料之組成
組成分	飼料
	Summcit 飼料	基本飼料
玉米筋粉(62％CP) 玉米纖維素明膠(88％CP) 離氨酸－HCl 磷酸氫鈣家禽脂肪玉米油 l －魚精氨酸石　灰息寧氨酸食鹽 Dl－甲硫氨酸維生素預混物⁽¹⁾ 黃豆油餅(48.5％CP) 微量－礦物質預混物⁽²⁾ 硒預混物⁽³⁾ 氯化膽鹼(60％) 玉米澱粉計算分析　CP％　ME kcal／g 　鈣％　有效性P％　甲硫氨酸＋胱氨酸％　離氨酸％　魚精氨酸％　息寧氨酸％　色氨酸％	55.00 13.77 13.09 5.00 2.20 2.09 2.00 2.00 1.62 1.38 0.50 0.40 0.26 0.25 0.15 0.05 0.05 0.20 　　 45.00 3.11 1.00 0.50 2.00 2.50 2.90 1.70 0.15	13.03 　　 2.67 2.00 2.00 　 1.09 　 0.40 　 0.25 　 0.05 0.05 0.20 78.26 　 0.00 3.11 1.00 0.50 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
(1)每Kg飼料供給：維生素A 5,500IU；維生素D₃ 1,100ICU；維生素E 11IU；維生素B₂ 4.4mg；泛酸鈣12mg；菸鹼酸44mg；氯化膽鹼220mg；維生素B₁₂ 6.6μg；維生素B₆ 2.2 mg；Menadione 1.1mg(如Menadione重亞硫酸鈉)；葉酸0.55mg；α－生物素0.11mg；維生素B₁ 2.2mg；ethodyquin 125mg。 (2)供給飼料之ppm量：鎂60；鋅50；鐵30；銅5；碘1.5。 (3)供給：每Kg飼料亞硒酸鈉之硒0.1mg。

表二預測(1)及分析(2)之基本飼料的色氨酸組成及蛋白質含量
試驗號	色氨酸		蛋白質
	預測	分析	預測	分析
1 　　　 2 　 3	％ 0.05 0.07 0.09 0.10 0.05 0.10 0.10 0.17	％ 0.10 0.12 0.15 0.17 0.10 0.17 0.10 0.17	％ 16 20 24 28 16 28 16 28	％ 17.2 20.6 25.2 28.8 16.9 28.9 17.0 28.8
(1)自NRC (1984)成分組成表預測。 (2)以HPLC分析色氨酸，以Kjeldahl方法分析粗蛋白質。

在試驗處理14日後，測定增重，飼料攝取及組織，以Folch (1957)指定方去，測定總組織脂肪。各別以氣體層析法(1962 Brown及Brown)及Kjeldahe法(6.25×N)，測定給予色氨酸對粗蛋白質之低、中、高比例色氨酸飼料之雞，其各別的血漿脂肪酸及屠體氮(N)。藉心臟穿刺，收集血漿放入以EDTA外襯之小玻璃，分離前貯存於冰箱內1小時，傾倒出血漿，此血漿樣品貯存於－20℃有塞之小玻璃瓶，直至分析。

以逆相HPLC²在217nm測定血漿游離色氨酸，利用30,000mw膜過濾器，微濾血漿樣品，然後，在35℃，利用C₁₈μ Bondapack逆相圓柱分析過濾之樣品，洗液係由4：1之緩衝鉀對甲醇及水之溶液在每分鐘1.5ml組成。

藉Sato (1984)修正之方法，測定完整飼料蛋白質之色氨酸水解，在120℃之4M LiOH，樣品消化20小時，在無氧條件下行消化，此水解產物以30,000mw膜過濾，過濾液供作分析24小時內消化之色氨酸，同於血漿。

利用非直線迴歸，測定適當處之需求量及最大之反應，利用一導出之曲線，中斷線範式(1973 Gallant及Fuller)，配合資料。

此地B₁為常數，且常輸入在需求量以下時，Ｉ＝1；否則Ｉ＝0，當3或較很少之量水準，包括於設計時，利用變異數分析檢定處理平均數之差異。當輸入對反應變數之相關，為一簡單曲線時(以使達最小殘餘測定)，利用簡單直線迴歸。雖然在試驗之間，有絕對增重之差異，但在每一試驗內，當資料以最大平均反應(MAXE)之比例(即Xe／MAXE)表示時，沒有試驗×色氨酸水準之交互作用，以試驗之非直線迴歸(同樣模式)，測定最大平均反應，因此，收集資料供作分析及模式配合。

增重及依據預估線之估計需求量，在17，20.5，25.2及28.8％粗蛋白質時，色氨酸對粗蛋白質比例，各別為0.83±0.03，0.77±0.04；0.77±0.05及0.78±0.05，其增重達最大。在17，20.5，25.2及28.8％粗蛋白質，對飼料效率之需求量，各別為0.80±0.03，0.75±0.06，0.81±0.06及0.77±0.08。飼料效率結果，一般是較多變異，且比增重產生較低之模式測定的係數(表3)，對所有資料，對增重及飼料效率之估計需求，各別為0.80±0.04及0.80±0.01。在所有缺乏群，飼料攝取降低，且在每一試驗內，與增重成比例(表4及表5)，飼料效率遵循同一模式(表6)。

表三對增重及飼料效率之參數估計及測定之係數
粗蛋白質(％)	測定	靶式參數
		最大	B₁	需求量⁽¹⁾	R²
17.0 17.0 20.6 20.6 25.2 25.2 28.8 28.8	增重飼料效率增重飼料效率增重飼料效率增重飼料效率	0.94 0.97 0.95 0.97 0.95 0.93 0.94 0.95	－1.75 －1.27 －1.51 －0.70 －1.67 －0.70 －1.41 －0.63	0.83 0.80 0.77 　 0.77 0.80 0.78 0.77	0.90 0.86 0.63 0.37 0.53 0.45 0.77 0.56
(1)g色氨酸／100g蛋白質

表六在各不同水準之飼料蛋白質及色氨酸對粗蛋白質之比，雞之平均飼料效率 (增重／飼料攝取)
比⁽¹⁾	17％蛋白質試驗			20.8％蛋白質	25.2％蛋白質	28.8％蛋白質試驗
比⁽¹⁾	1	2	3	試驗 1	試驗 1	1	2	3
0.59 0.71 0.82 0.89 0.94 1.06 1.18 1.42 1.72 2.01 2.31 2.60 2.85	0.285 　　 0.343 　　 0.351 0.356 0.355 0.339	0.231 　　 0.328 　　 0.317 0.331 0.315 0.329 0.338 0.311 0.323	0.186 0.268 0.312 　 0.313 0.305	0.331 　　 0.389 　　 0.368 0.380 0.391 0.361	0.341 　　 0.442 　　 0.410 0.419 0.393 0.393	0.425 　　 0.434 　　 0.473 0.430 0.446 0.459	0.417 0.442 0.424 0.442 0.437 0.459 0.406	0.372 0.432 0.455 　 0.466 0.426
(1) g 色氨酸／100g粗蛋白質

在每一色氨酸水準，飼料之蛋白質水準，顯著(P＜0.0001)增加屠體含量率，約1％。色氨酸對粗蛋白質之比例，影響屠體含量之N，居間之水準(1.72g色氨酸／100gCP)產生最高之屠體氮含量，檢出一顯著的二次效果(P＜0.0001)，屠體脂肪與飼料之粗蛋白質水準，成反比例(表8；P＜0.0001)，當粗蛋白質增加時，血漿或肝之總脂肪含量，沒有檢出變化，當飼料增加色氨酸比例時，顯著的二次效果，與肝脂肪有關聯，使用1.83±0.48g色氨酸／100g CP，可預期最小之肝脂肪，在血漿總脂肪或在屠體脂肪，沒有檢出由於色氨酸對粗蛋白質比之顯著差異。

表八肝、血漿及屠體之總脂肪含量受飼料之粗蛋白質水準之影響
蛋白質	總脂肪
	肝 (％)	血漿(mg／100ml)％	屠體
17.0 20.8 25.2 25.8 機率	3.93±0.052 3.84±0.017 3.81±0.11 3.93±0.04 NS	621±16 595±26 599±22 594±17 NS	11.88±0.16 10.21±0.29 8.82±0.29 8.14±0.10 0.0001
(1)X±SE 主要效果平均數

粗蛋白質水準會影響血漿脂肪酸之全盤輪廓(表9)，增加蛋白質，會顯著降低血漿棕櫚酸(P＜0.048)及油酸(P＜0.014)之總量，且也增加亞麻仁油水準，色氨酸對粗蛋白質之比例，顯著影響肉黃蔻酸(Myristic acid)及亞麻仁油酸含量。

表九血漿總脂肪之脂肪酸組成受飼料之粗蛋白質水準及色氨酸對粗蛋白質之比的影響
脂肪酸	17.0％蛋白質及比例			28.8％蛋白質及比例			蛋白質或然率	比或然率
脂肪酸	0.59	1.72	2.85	0.59	1.72	2.85	蛋白質或然率	比或然率
白黃蔻酸棕櫚酸棕櫚油酸硬脂酸油酸亞麻仁油酸亞麻脂酸 Eicosatrienoic 花生烯酸	0.58 22.50 2.68 14.92 23.24 20.80 0.65 2.41 8.82	0.96 22.11 2.77 14.74 20.33 22.41 0.57 2.07 10.19	0.60 22.88 3.16 13.51 22.13 22.52 0.52 2.00 8.02	0.70 22.94 2.62 14.95 18.84 22.32 0.48 1.71 9.69	0.97 23.77 2.82 13.77 21.60 22.65 0.55 1.76 7.94	0.53 22.94 2.00 14.43 18.01 26.14 0.54 1.96 8.47	NS NS 0.048 NS 0.012 0.005 0.018 0.013 NS	0.016 NS NS NS NS 0.011 NS NS NS

當飼料之全色氨酸含量增加時，拌隨增加血漿亞麻仁油酸含量，居間之色氨酸粗蛋白質比例，血漿肉黃蔻酸達尖峰(一種顯著的二次效果)，血漿游離色氨酸，在17及28.8％粗蛋白質飼料，各別於每ml有最大之4.7±0.2及5.9±0.4mg時，達尖峰，在17.0及28.8％粗蛋白質，血漿游離色氨酸之最大需求量，較高於增重之需求量(0.80±0.04)。

自本試驗所見之色氨酸與粗蛋白質之間所見之量相關，類似於300mg arrdt及Baker之發現(1971)。自本試驗之估計需求量，為0.80g色氨酸／100g CP，較低於Boomgaardt及Bake (1971)之數值0.87g／100g CP。據Smith及Waldroup (1988)之最近的報告指出，對20％CP飼料，雞之色氨酸需求量，等於或較少於飼料之0.16％或0.80g色氨酸／100g CP(那正是在本試驗之1，2及3，在同樣蛋白質水準之估計值)。

Morris (1983)檢討，闡明像此報告之發現試驗結果之數種數學模式的優劣處，且自公佈資料之試驗，需要某些曲線分析式。此地適合之模式，很類似Morris (1983)提出之所謂「讀數模式」，在此模式有曲線上昇段及尖峰。在此地配合之模式，有曲線上昇段及尖峰，估計需求量之信任區間，指示資料之可靠性，若不適當點在需求量之面積有效，這反映於寬信任區間。

Almquist (1957)斷定曾適當的證實，胺基酸需求量，幾乎直接隨蛋白質攝取，而有不同，此結論是依據雞，火雞及豬之大體資料，且本研究之試驗1～3支持此點。Almquist (1956)示出數種胺基酸水準之對數，雞增重率之繪製圖，對甲硫氨酸，離氨酸，魚精氨酸及色氨酸之平均反應線，代表需求量之一定比例的強證據，由Almquist (1957)利用之對數給製圖，示出一很類似應用於本研究試驗1～3模式之線。

瞭解平均每日色氨酸需求量是值得需要，且能自示於試驗1～3之結果計出。用於此地之飼料為半純粹，且沒有導致成長率可與由商業性飼料產生的相比。一種直接外推法，不能證明自試驗1～3到商業性情勢之色氨酸攝取結果是正確，但本研究之結果示出，若知道商業性肉雞之蛋白質攝取，則0.80及1.83g色氨酸／100g CP攝取，將各別使體增重達最大及使肝脂肪量達最小。

雞屠體氮較少由於飼料之色氨酸水準之變化，似乎與其他種類基於生化學發現之結論相反(1968，1987，1984 Sidransky；1988 Lin)。Lin (1988)報告，隨飼料之色氨酸濃度增加，會增加肌肉核酸糖小體之蛋白質合成活性，但沒有測定屠體之淨蛋白質增大。在色氨酸缺乏雞，總屠體氮之降低(試驗3)，可能歸因於較低之增重及蛋白質消耗，粗蛋白質對總屠體氮之效果，與先前之發現(1985 SummerS及Leeson)一致。自這些資料沒有證據表示，在研究水準之色氨酸，對屠體之淨蛋白質蓄積率，有任何影響，無關飼料之總蛋白質水準。

隨增加蛋白質含量，會降低屠體脂肪，但肝脂肪沒有降低，此點與先前之發現(1943 Fraps；1969 Yeh及Lereille；1975 Edwards及Denman；1979 Bartor)一致。Marion及Edwards (1962，1963)有報告，對供給低及高蛋白質飼料和適當之脂肪水準，肝脂肪含量沒有顯著差異。增加飼料蛋白質，一般會降低雞之血漿游離氨基酸(1969 Yeh及Leveille；1975 Lereille)，但在本研究，血漿總脂肪和飼料蛋白質沒有關聯(表8)，在本研究之三醯基甘油的重新合成或飼料之脂肪攝取，可能蒙蔽血漿之脂肪部的個別部分之任何差異。

鼠注入大量之色氨酸，會增加肝脂肪(1967 Mirata；1973 Sakurai；1981 Rao)。但沒有研究指出，肝脂肪降低，是歸因於飼料之色氨酸濃度，不是緩和氨基酸之不平衡，Akiba (1988)有報告，藉增加飼料色氨酸，產蛋雞之肝脂肪降低，但改善超過一種已缺乏色氨酸之基本飼料(0.15％)。

自本研究之試驗1～3之資料，明然的指出，在缺乏色氨酸群之肝脂肪含量的上昇，只有在色氨酸對粗蛋白質比，兩倍以上於最大增重所需水準，會最小，是否給予較高水準之色氨酸群，開始增加肝脂肪，少明然。本研究所用之水準，沒有接近其他研究者用於鼠之水準，色氨酸對降低肝脂肪之效果的正確機構，仍待確定。

總屠體脂肪率沒有變化，甚致當飼料明然缺乏色氨酸時(P＜0.10)。變化僅發生於總量(脂肪g數)，因較小雞是給予缺乏色氨酸群，顯然，色氨酸沒有影響屠體之脂肪分配。

當飼料之色氨酸濃度增加時，血漿脂肪沒有發生變化，曾出現有關人類掛慮色氨酸對血漿脂肪之影響的矛盾報告(1975 Raja及Jarowski；1987 Kohls)，用於人類為主題之試驗的色氨酸水準，較高於本試驗所用之水準，Rao (1980)有報告，由於鼠注射色氨酸，會增加血漿脂肪。種類之間的差異可能存在，或可能有較高水準或不同處理經路之藥物學效果。

飼料蛋白質對血漿胺基酸組成之變化影響，類似於先前在脂肪組織之組成所見之變化報告(1975 Edwards及Denman)。在本研究很多變化可能反映飼料組成，因在低蛋白質飼料，有比其他飼料較多比例之卡路里，可能歸因於醣類，但所有飼料有同水準之添加脂肪，對此由於色氨酸之脂肪酸輪廓變化之理由，較少明然。因飼料之脂肪酸輪廓，在每一蛋白質水準內為完全一樣，所以增加重新合成或降低亞麻仁油酸之遞解，可能引起昇高。

Zimmerman及Scott (1965)有報告，超過需求量之離氨酸，魚精氨酸，纈草氨酸，會直線且急速蓄積於血漿，且此需求量與開始蓄積於血漿之差符合，血漿色氨酸遵循本研究之不同範式，以本試驗估計時，使用17％CP飼料之最大增重之色氨酸需求量為0.80／CP，飼料達此水準前，血漿色氨酸水準在增加，此後達尖峰，使用28.8％CP飼料亦是一樣。

一旦達此需求量，游離血漿色氨酸之穩定水準指出，雞之高程度調節。使用17％CP飼料，飼料色氨酸濃度在飼料之0.17±0.01以上(或使用28.8％CP飼料，在飼料之0.26±0.01)，沒有導致血漿色氨酸蓄積。顯然地，雞之代謝，對在每一種蛋白質水準之游離血漿色氨酸量，調節一新「設定點」，由達最大之顯著差異可證實(對17％及28.8％CP，各別為4.7±0.02對5.9±0.4)，因色氨酸涉及數種代謝經路，並在血漿發生結合及游離兩型，所以其他代謝改變，可當歸因於較高水準之循環色氨酸，此解答可能在於是否任何變化，亦發生於血漿色氨酸之結合分部。

自本研究，著者斷定，肝脂肪增加是表示，肉雞之色氨酸需求量缺乏，在17％CP與28％CP之間，至少雞之色氨酸需求量為0.80g／100g CP，最後，所見之血漿離氨酸水準，不是雞之色氨酸需求量的良好指示劑。

表四在不同水準之飼料蛋白質及色氨酸對粗蛋白質之比雞之平均增重 (每 14 日之克數)
比⁽¹⁾	17％蛋白質試驗			20.8％蛋白質	25.2％蛋白質	28.8％蛋白質試驗
比⁽¹⁾	1	2	3	試驗 1	試驗 1	1	2	3
0.59 0.71 0.82 0.89 0.94 1.06 1.18 1.42 1.92 2.01 2.31 2.60 2.85	76 　　 120 　　 113 120 112 104	56 　　 103 　　 97 102 94 100 106 98 97	46 88 109 　 119 108	94 　　 142 　　 133 136 138 124	91 　　 140 　　 142 144 128 129	132 　　 148 　　 168 151 159 148	95 　　 144 　　 139 148 143 147 131 141 132	112 166 189 　 176 169
(1)：g色氨酸／100g粗蛋白質

表五在不同水準之飼料蛋白質及色氨酸對粗蛋白質之比的雞之平均飼料攝取 ( 每 14 日之克數 )
比⁽¹⁾	19％蛋白質試驗			20.8％蛋白質	25.2％蛋白質	28.8％蛋白質試驗
比⁽¹⁾	1	2	3	試驗 1	試驗 1	1	2	3
0.59 0.71 0.82 0.89 0.94 1.06 1.18 1.42 1.72 2.01 2.31 2.60 2.85	265 　　 350 　　　 323 337 314	243 　　 313 　　 304 307 298 303 314 312 302	246 327 348 　 378 352	282 　　 365 　　 362 359 352	265 　　 316 　　 346 343 324	309 　　 340 　　 355 350 324	259 　　 325 　　 333 334 338 334 319 308 325	301 285 414 　 378 400
(1) g 色氨酸／100g粗蛋白質

表七屠體蛋白質含量受飼料粗蛋白質及色氨酸對粗蛋白質比之影響
比	蛋白質水準		浱
	17.0％	28.8％
0.59 1.72 2.85 浱	16.4±0.3 16.7±0.3 16.2±0.2 16.5***	17.1±0.4 17.8±0.4 17.5±0.1 17.5	16.8 17.3 16.9
(1)浱±SE ***P＜0.0001