以生菌劑投與肉雞、對其發育及腸內細菌叢之影響
日本國內之雞肉需給量約達170萬噸(1988)，迫近豬肉之200萬噸。雞肉之輸入量也在逐年增加，在擔憂輸入雞肉之細菌污染，在此背景中，日本厚生省，自食品衛生之觀點，創設食鳥檢查制度，自1990年4月實施，1991年4月可成實施之階段。
食鳥檢查制度，目前雖僅止於檢查疾雞，但亦有先得消費者之健康指向，天然指向，設置遠比殘留抗生素之檢查等食鳥檢查制度還嚴格之基準的企業，並且亦出現，自主延長出荷前1週之休藥期間。
由以上得知，在肉雞之生產現場，自僅重視後來之增體重之方向，不得不轉換亦一併考慮減少疾雞，少ca pylobacter或沙門氏菌等細菌污染問題之清潔食鳥。
因此，在本試驗，將以生體防禦及抑制campylobacter為目的，於後期~休藥飼料，添加生菌劑(clostridium butyricum Miyairi 588)，檢討對肉雞之發育及腸內菌叢之影響。
一、材料及方法
1. 試驗實施期間
在1988年10月16日至11月14日之29日，於岐阜縣之A肉雞農場實施。
2. 供試雞：利用32日齡之肉雞(愛拔益加，富士)。
3. 供試製品
以1公克中含有107個以上之clostriduim butyricum Migairi 588(以下簡稱CBM588)之芽胞的Miyairi散製劑，作供試。
4. 試驗區分
對照區及投予區之供試隻數，均為7,300隻，投予區之飼料有添加0.1％Miyairi散製劑。
5. 飼料
利用沒有含有生菌劑之市售的肉雞肥育用飼料，各飼料之給與期間，為自生後32日齡至後期用飼料(含有抗生素nosipeptide 2.5g力價／噸，硫酸colistin 5g力價／噸，lasalosid Na 75g力價／噸)22日，休藥飼料7日。
6. 飼養管理
以無窗雞舍平飼，行床面給溫(陰壓換氣方式)。
7. 檢查項目
(1)飼養試驗：增體重，飼料攝取量，其他。
(2)腸內細菌叢
於試驗開始時(32日齡)，出荷時(61日齡)，各區之肉雞逢機各擇3隻及5隻，宰殺，採取其迴腸及盲腸內容物。依光岡氏之方法，測定Euterobacteriaceae，Staphylococcus及C. Perfringens。
對campylobacter，依伊藤氏之方法，就發生於選擇培養基(Butzler)之集落，行形態，takadase、oxydase，好氣性培養等，作分離，同定。
以透明石膏(selenite)培養基培養之沙門氏菌液，塗抹於DHU(日水)培養基及MLCB(日水)培養基，自培養發生之H2S產生及透明集落，行確認試驗，確認培養基自利用TSI，SIM(日水)之培養試驗的結果，對顯示沙門氏菌之性狀者，再利用腸內細菌同定用設備〔EB─20(日水)〕，作同定。
二、結果
1. 飼養試驗
飼養試驗之結果示於表1。投予區有飼料攝取量及出荷率高之趨向，飼料要求率有投予區改善之趨向。且生產係數，對照區為171.2，投予區為200.1，以投予區較高。
表1. 投與生菌劑CBM 588對發育之影響
| 區／項 | 對照區 | 投與區 |
| 開始給與隻數(隻) | 7,300 | 7,300 |
| 出荷隻數(隻) | 6,957 | 7,023 |
| 出荷率(％) | 95.3 | 96.2 |
| 出荷總重量(Kg) | 18,293 | 18,819 |
| 平均體重(g／隻) | 2,636 | 2,680 |
| 增體重(g／日) | 46.1 | 47.0 |
| 飼料總攝取量(Kg) | 42,165 | 42.53 |
| 飼料(Kg／隻) | 6,061 | 6,056 |
| 飼料要求率 | 2.30 | 2.26 |
| 出荷日齡(日) | 57 | 57 |
| 生產係數(PS) | 191.2 | 200.1 |
2. 腸內細菌叢
試驗開始時(32日齡)及出荷時(61日齡)之腸內細菌叢，示於表2，投與區各部位之Enterobacteriaceae，有較低於對照區之趨向，尤其在迴腸部位，與對照區之增殖度相比，投與區較少，有較受抑制之趨向。
表2. 因CBM 588之投與，引起之腸內細菌叢之推移(log，CFU／g±S.D)
| 項目 | 區 | 迴腸 | 盲腸 | ||
| 投與前 | 投與後 | 投與前 | 投與後 | ||
| Enterobacteriaceae 〞 Staphylococcus 〞 沙門氏菌 〞 Camphylobacter 〞 C. perfringens 〞 |
對照區 投與區 對照區 投與區 對照區 投與區 對照區 投與區 對照區 投與區 |
4.8±1.2(3) 3.9±1.3(3) 4.3±0.7(3) 4.8±0.9(3) N.D (3) N.D (3) 4.9±0.4(3) 5.3±0.5(3) 2.5 (1) 3.1±0.6(2) |
6.2±0.9(5) 4.9±1.1(5) 5.1±0.9(5) 4.3±0.4(5) N.D (5) N.D (5) 6.3±0.6(5)* 5.7±1.0(5) 3.1±0.5(4) N.D |
9.2±1.1(3) 8.4±1.1(3) 4.8±1.3(3) 4.5±1.1(3) N.D (3) N.D (3) 8.7±0.3(3) 9.2±0.4(3)* 5.1±0.6(3) 4.8±0.9(3) |
8.5±0.7(5) 8.0±0.4(5) 4.5±1.0(5) 4.4±1.1(5) N.D (5) N.D (5) 8.8±0.2(5) 8.3±0.3(5) 6.0±1.1(5) 4.9±0.5(5) |
註：N.D為檢出限界以下，供試隻數＝投與前3隻，投與後5隻。
( )數字為檢出隻數。
*：P＜0.05。
Staphyloeccus在迴腸部位，於投與期間，對照區有增加趨向，但投予區有減少趨向，在盲腸部位，沒有發現因CBM 588投予之影響。
自任何檢體，亦沒有檢出沙門氏菌。
Campylobacter在試驗開始時，業已自各區之迴腸部位及盲腸部位，各別檢出104~105／g及108~109／g之較高水準。投予期間中之各部位的菌數推移，在迴腸部位，以對照區有顯著差異(P＜0.05)增加，但投予區幾乎沒有發現增加，但在盲腸部位，對照區幾乎沒有變化，但投與區則以顯著差(P＜0.05)減少。
C. perfringens在試驗開始時，自盲腸部位，各區均檢出104~105／g之較高水準。投與後之各部位的菌數推移，在迴腸部位，自5隻中之4隻，檢出103／g水準，但自投予區，卻沒有檢出任何檢體，且在盲腸部位，投予區之菌數為對照區之1／10，對照區有增加趨向，但在投予區則幾乎不見菌數增加。
投予CBM588後，自投與區之迴腸及盲腸部位，可檢出102~103之水準。
三、考察
以生菌劑之CBM588，添加於肉雞後期飼料之休藥飼料，檢討對其發育及腸內細菌叢之影響。
以CBM588投予開始時及投與後之腸內細菌叢的推移來看，Campylobacter在迴腸及盲腸部位，有較低於對照區之趨向，與 野氏之Campylobacter jejuni對C. butyrieum Miyairi培養濾液之拮抗作用之成績一致。且感染球蟲時會增殖之C.Perfringens，投予CBM 588時，亦顯示會抑制C. Perfringens之趨向，這啟示可期待抑制球蟲症之發生。又，Enterobacteriaceae及Staphylococcus在迴腸部位，亦成增殖受抑制之趨向。
因食鳥肉之Campylobacter污染，是依食鳥處理現場之狀況而異，主要發生於解體時，在處理過程中必須消毒，此地，菌體數要限於102程度以下。因此，必須抑制搬入處理場之肉雞，自體之食中毒原因菌菌數於低水準。亦即，處理場側，期待具有較少沙門氏菌，Campylobacter，C. Perfringens及Staphylococcus等更健康之乾淨的腸內細菌叢肉雞。
關於CBM，有對沙門氏菌或毒素原性大腸菌等腸內有害菌之拮抗作用，乳酸菌群等有用菌的發育促進作用及抗緊迫作用等報告。且據光岡氏之報告，動物置於緊迫條件下，腸內菌叢之平衡，成有害菌增加，且有用菌減少之變動方向。亦即，投予生菌劑，可改善因緊迫引起之異常的腸內菌叢，抑制營養素之奪取或產生有害物質，或介入免疫能之增強，結果，可理解能誘致改善宿主之發育或飼料效率。
在本試驗，由於有發現投予CBM588，有減少有害菌及提高飼養成績，所以啟示CBM588投與，有本試驗目的之強化生體防禦趨向，及對細菌污染問題之菌，尤其是抑制Campylobacter有實用化之可能性。
飼料營養雜誌(p.78∼81)─陳厚基．九三年第十二期