雞減蛋綜合癥
(EDS-76)研究進展
雞減蛋綜合癥(Egg Drop Syndrome-1976，EDS-76)是一種由腺病毒引起的病毒性傳染病，其主要特徵是產蛋量驟然下降，蛋殼異常，蛋體畸形，蛋質低劣。雞減蛋綜合癥(EDS-76)最早是由Van Eck於1976年首先報導該病在荷蘭發生，1977年分離到EDS-76病原體(病毒)。該病可使雞群產蛋率下降10~50％，蛋的破損率可達38~40％(Darbyshire,1980)，無殼蛋，軟殼蛋達15％，給養雞業帶來嚴重的經濟損失，被列入雞四大病毒性傳染病之一。因此，世界各國對此極為重視。隨著我國從國外引種頻繁，近幾年也被發現並引起高度重視的EDS-76新病，各方面的研究取得了很大進展。
一、病原學
1. 病毒形態特徵：
EDS-76的病原是腺病毒屬無囊膜的雙股DNA病毒，其粒子大小為76~80nm，病毒顆粒呈正二十面體，衣殼有12個頂，30個稜，252個殼微粒。其中240個六聚體，12個五聚體分別位於二十面體頂角上(電子顯微鏡下的超微結構)。衣殼的結構，殼微粒的數量等均具有典型的腺病毒特徵。病毒DNA的分子量為22.6×106道爾頓，這明顯的小於雞腺病毒代表毒株雞胚致死孤兒病毒(CELO)的分子量28.9×106道爾頓，與哺乳動物的腺病毒相近。
2. 病毒免疫學及血清學特點：
EDS-76病毒於經口接種後7天可在血清中檢出HI抗體，14~21天後HI抗體達到高峰，HI滴度在1：1280-1：2560之間，30天後開始下降，但一直都能檢測出HI抗體。AGP試驗抗體可在經口感染後6~9天檢出，15天後開始下降。VN抗體可在接種後6天時檢出。ELISA抗體在接種後6~7天可以檢出。EDS-76病毒含有紅細胞凝集素，能凝集雞、鴨、鵝的紅細胞。而其它禽腺病毒主要是凝集哺乳動的紅細胞，這與EDS-76病毒不同。
3. 病毒的理化特性：
EDS-76病毒有抗醚類的能力，在50℃條件下，對乙醚、氯仿不敏感。對不同範圍的pH值性質穩定，即抗pH範圍較廣，如在pH值為3~10的環境中能存活。加熱56℃可存活3小時，60℃加熱30分鐘喪失致病力，70℃加熱20分鐘則完全消滅，在室溫條件下至少存活6個月以上。0.3％甲醛24小時，0.1％甲醛48小時可使病毒完全消滅。
4. 病毒的生存特性：
EDS-76病毒能在鴨腎細胞、鴨胚成纖維細胞、雞胚肝細胞、雞腎細胞和鵝胚成纖維細胞上生長，且增殖良好；在雛雞肝細胞、雞胚成纖維細胞、火雞細胞上生長不良；在哺乳動物細胞上不能生長。接種在7~10日齡鴨胚中生長良好，並可使鴨胚致死，其尿囊液具有非常高的血凝滴度，可達218；而接種在5~7日齡雞胚卵黃囊中，可使胚體萎縮，孵出率降低。
5. EDS-76毒株分離：
自1976年Van Eck在荷蘭發現EDS-76，1977年分離出病毒以來，各國相繼陸續分離出了EDS-76病毒株：(1)1978年McFerran J.B在北愛爾蘭從患雞鼻粘膜病料中分離到Mc-127株，即"血凝因子127"。(2)Baxendale(1978)在英格蘭從雞的外周血細胞中分離到了BC-14株。(3)由英國毫頓禽病研究所從病雞的洩殖腔中分離到D-61株。(4)匈牙利學者分離到B8／78株。(5)台灣分離到TN株。(6)日本分離到H-62株，Jap-1、KE-80及ME-80株。(7)法國從引進的雞中分離到38、77株。(8)南京農業大學在中國大陸首次從外地引進的海賽克斯雞中分離出EDS-76病毒株，命名為NE4株。江蘇農學院分離出H91-1株(朱國強，1992)。江蘇牧醫所分離出GS-1株。四川省畜牧獸醫研究所(1992)分離出CH-1株。
二、流行病學
1. 分佈：
EDS-76流行十分廣泛，呈世界性分佈。現除了中國大陸和台灣已發現有此病外，歐洲的荷蘭、法國、英國、義大利、德國、西班牙、丹麥、比利時、瑞典、挪威、俄羅斯、南斯拉夫、奧地利、波蘭、匈牙利、希臘、盧森堡、以色列等；美洲的美國、巴西、阿根廷、墨西哥等；非洲的安哥拉、尼日利亞；大洋洲的新西蘭、澳大利亞；亞洲還有日本、印度、伊拉克、南朝鮮、新加坡等都發現有該病發生。中國大陸的北京，廣州、鞍山、大連、天津、濟南、廣東、上海、無錫、山東、山西、河南、江蘇、四川等省地已發現有此病。
2. EDS-76的易感動物：
EDS-76病毒除了可使不同品種，不同年齡的雞感染外，在家鴨、家鵝、野鴨、珠雞、火雞、鵪鶉、俄羅斯鴨、北京鴨、天鵝、加拿大鵝、鳧、海鷗、麻雀、貓頭鷹、鸛和白鷺等也可產生不同程度的抗體和排出病毒。鴨感染後雖不發病，但長期帶毒，帶毒率可達80％以上。
3. 傳採方式及傳播途徑：
EDS-76主要是經垂直傳播，也可經水平傳播。垂直傳播是被感染的精液和有胚胎的種蛋傳播給下一代(McFerran et al., 1978)。水平傳播主要是通過唾液、洩殖腔排洩物排毒。而自然感染是經口感染。被污染的雞蛋、盛蛋工具、雞場、飼料、用具是經常性的傳播媒介。
4. 流行形式：
EDS-76的流行一般發生在產蛋50％期與高峰期之間，即25~35週齡期間，產蛋下降幅度一般為10~25％，高達30~50％，持續4~10週，然後恢復到原來的產蛋水平，產蛋曲線呈"馬鞍形(見圖1)。Pejkovski等(1982)報導，發病雞第一週變形佔33.9％，第二週佔49.4％，第三週佔39.6％，第四週佔26.1％，第五週逐漸恢復到正常。Baxendale(1977)對自然感染EDS-76的雞群觀察發現，EDS-76流行主要發生在26~32週齡，病雞的受精率正常，但孵化率則明顯降低，死胚率由正常的6~8％增加到10~12％。EDS-76的水平傳播速度緩慢，病毒在整個一棟雞估擴散大約需幾週。雞糞是水平傳播的主要方式，故平地飼養比籠養傳播迅速。
5. 流行因素：
(1)雞體內病毒的活化：雞在性成熟前為隱性感染，當毒離開產時所遇到的一此應激因素，促使激素分泌發生改變，這樣就成長EDS-76病毒活化的啟動因子，從而導致發病。所以，在雞開產時，才表現出臨床癥狀。
(2)雞的易感性：EDS-76的流行，主要取決於病毒毒力的強弱和雞對病毒的易感性。有人觀察發現，EDS-76病毒對20週齡以下的雞感染率較低，僅為8％；20週齡以上的雞感染率較高，這可能與卵巢的發育及產蛋有關。用微量血凝抑制(MHI)試驗調查表明，公雞的易感性比母雞高(辛盛鵬，1993)。
(3)檢疫不嚴：在進口種禽味未經嚴格疫和隔離觀察，隨進口種禽而帶入本病。國內許多地方從外省地方州引進禽類尤其是種雞種蛋時，未經嚴格檢疫而帶入本病。
(4)種蛋選擇不利：在選擇種蛋時，未把產蛋下降期的蛋和異常蛋徹底剔除，從而造成本病的垂直傳播。
(5)消毒不嚴或消毒效果不確實：由於EDS-76病毒對一些化學消毒藥物有較強的抵抗力，所以，一般消毒藥物很難奏效。故而，消毒時必須選用合適的消毒藥物和達到一定的消毒時間。
(6)未經免疫接種：由於該病是近幾年來在國內才發生的新病，所以對本病容易忽視，大多未進行疫苗預防接種，或有的在預防接種時效果不確實，致使雞群對本病毒有較高的易感性，一旦發病，容易流行。
三、臨床癥狀及病理變化
1. 臨床癥狀：
雞患有EDS-76主要表現出產蛋下降。患病雞群部分雞可出現精神差、厭食、羽毛蓬鬆、貧血、腹瀉等癥狀。有的雞在產蛋前已感染本病，終生不再出現產蛋高峰。在產蛋下降的同時，雞常產各種畸形蛋，如蛋殼皺縮，蛋形改變，蛋殼表面附有數量不等的石灰斑沉著，蛋殼顏色改變，褐色蛋殼退色變成灰白色，也有出現軟殼蛋，無殼蛋，甚至這種蛋在一天內可產數個。蛋清希薄如水，內有部份混濁的絮狀物附著。中雛感染本病後常無臨床癥狀，老齡雞感染本病時，在出現異常蛋前後可伴發輕度腹瀉癥狀。由於患EDS-76的雞日齡不同，因此感染的輕重程度也不同，對日後產蛋量的影響也不同。據報導，以174日齡發病者最輕，214日齡發病者次輕，259日齡發病者最重(趙清，1992)。
2. 病理變化：
發生本病的患雞常缺乏明顯的病理變化。其特徵性病變是輸卵管各段粘膜發炎、水腫、萎縮。病變的卵巢縮變小，或有出血，子宮粘膜發炎，腸出現長他性炎癥。病理組織學檢查子宮輸卵管腺體水腫，單核細胞浸潤，粘膜上皮細胞變性壞死。子宮粘膜及輸卵管固有層出現漿細胞、淋巴細胞和異嗜細胞浸潤。輸卵管上皮細胞核內有包涵體，核仁，核染色質偏向核膜一側。包涵體染色有的呈嗜酸性，有的呈嗜侫性。人工感染SPF雞後，子宮出現淋巴濾泡，其它器官無明顯變化。Moorthy(1987)報導用127株病毒感染來航雞，曾典型的病理組織學變化是肺、肝、腎及腺胃出血和淋巴樣細胞侵潤，生殖器官只見輸卵管萎縮，卵巢纖維化或有時有出血，卵泡軟化，其它無明顯病理變化。
四、EDS-76導致產蛋異常的發病機制
患有EDS-76的雞出現產蛋異常是由於EDS-76病毒侵害靶器官及其複製場所─ ─輸卵管功能異常所致，健康雞輸卵管漏斗部和峽部粘膜的pH值為6.5±0.3，而患有EDS-76的雞此處的pH值則為6.0±0.3(Van Eck，1979)，這就表明了子宮粘膜內的pH值的改變，導致了粘膜分泌功能紊亂。又由於酸度增加，溶解了大量鈣質，因而蛋殼形成受阻。螢光抗體的定位檢查表明。EDS-76病毒能使粘膜上皮細胞變性、脫落、細胞漿內分泌顆粒減少或消失及子宮的腺體細胞萎縮，這樣使得鈣離子轉運障礙和色素分泌量減少，並使輸卵管內pH值明顯降低，這種酸性環境可以溶解卵殼腺所分泌的碳酸鈣，使鈣鹽沈著受阻，從而導致蛋殼形成紊亂而出現蛋殼異常。由於輸卵管各部功能異常使雞的正常產蛋周期和排洩機制受到乾擾和破壞，導致產蛋率下降或產蛋停止。
五、診斷
由於許多疾病和環境因素都可造成密集飼養的雞群發生產蛋下降，因而診斷時必須根據病的流行特點，臨床癥狀，病理變化，血清學及病原分離和鑑定等進行綜合分析和斷定。
1. 流行特點：
一般發生在產蛋50％期與產蛋高峰期之間，即25~35週齡期間。
2. 臨床癥狀和病理變化：
在按照規定的正常的飼養管理條件下，雞群突然發生不明原因的群體性產蛋下降，並同時伴有畸形蛋，蛋殼褪色，變薄，蛋質下降。剖檢見有典型的生殖道病變。取病變粘膜壓片，進行包涵體染色，觀察其包涵體。臨床上無其他特異性表現時，可初步懷疑本病，以便早期診斷。
3. 病毒分離與鑑定：
從患雞的輸卵管，變形卵泡，無殼軟蛋，洩殖腔、鼻咽粘膜，腸內容物，糞便等採集病料，經過常規滅菌處理後接種在雞腎或鴨腎細胞上，孵育72~96小時後觀察細胞病理變化及核內包涵體(需進行包涵體染色)，並用血凝(HA)及血凝抑製(HI)試驗進行鑑定，用參比標準陽性HI血清檢測出細胞培養物的效價。接種在5~10日齡鴨胚尿囊腔，可使鴨胚致死，其尿囊液有高的凝集滴度。從EDS-76血清陽性的雞中，病毒的分離率約為63％。從產蛋異常的雞群中，病毒分離率可達60％。
4. 血清學方法
(1)血凝抑制(HI)試驗：
這是診斷EDS-76最常用的血清學方法之一。其原理是，EDS-76病毒含有紅細胞凝集素，可凝集雞、鴨、鵝的紅細胞，其凝集作用可被相應的EDS-76病毒抗血清所抑制，具有很高的特異性和敏感性。HI試驗多採用微量法，所以，也有叫做微量血凝抑制試驗(MHIT)。試驗用的抗原來自鴨腎或雞腎細胞培養物製備，也可用鴨胚尿囊液製備。抗原採用4個血凝單位(4HAU)，用pH7．1PBS，指示系統所用紅細胞為0.8~1％的雞紅細胞，採用常規操作程序進行。HI陽性標準在目前尚未統一，有人把1：32作為陽性，也有人將1：8判為陽性。B.N.布魯耶夫報導，感染EDS76後2~3週內的新鮮雞血清，HI滴度可達1：1280-1：2560。
(2)瓊脂擴散(AGP)試驗：
EDS-76病毒抗原與相應抗體在瓊脂凝膠中雙向擴散，在交接處形成肉眼可見的沉澱線，可用此法來檢測EDS-76病毒的抗原或抗體。按Darbyshire提出的方法，是在含1.5M NaCl PBS(0.01M,pH7.2)製備的1％瓊脂板上進行。
(3)病毒中的(VN)試驗：
EDS-76病毒能致細胞發生組織學病變，並產生核內包涵體，這種作用可被相應的抗血清中和而消除，故可採用本試驗檢驗EDS-76抗原或血清抗體。
(4)免疫螢光(IF)法：
Baxendale(1977)採用螢光法確定了EDS-76病毒與其它禽腺病毒有相同的抗原成份(抗原決定簇)。Adair(1978)採用螢光技術證明EDS-76病毒主要定位於感染細胞的細胞核。Mockett等(1984)也得出了同樣結果。
(5)𠕇聯免疫吸附試驗(ELISA)：
採用常規操作程序，此法與HI試驗相似，其敏感性好，特異性高。
(6)免疫斑點試驗(IBT)：
採用常規操作程序。
以上幾種方法均可用於EDS-76的診斷，各有其優缺點。HI法和IF同樣敏感，AGP法敏感性比IF和HI法稍差一些。採用ELISA，AGP，HI對EDS-76病毒感染的檢測結果比較證實，ELISA比AGP更為敏感，與HI結果相似，但ELISA可採用兩種抗原包埋(被)，簡化了與其它禽腺病毒感染的鑑別診斷。Piele(1985)利用HI，ELISA和AGP檢測實驗感染後的雞血清和蛋黃中不同時間的EDS-76抗體，認為氯仿提取的蛋黃適合於HI，ELISA和AGP試驗。
5. 與其它能致產蛋下降病的鑑別：
(1)EDS-76與傳染性支氣管炎的區別：雞傳染性支氣管炎除了有產蛋下降外，有明顯的呼吸道癥狀，氣管鑼音，喘息，咳嗽等。
(2)EDS-76與非典型雞新城疫的區別：非典型雞新城疫也能引起產蛋下降，產軟殼蛋。但雞群中還會同時出現病死雞，當全雞群測定雞新城疫抗體時，能得出鑑別。死雞剖檢病變有雞喉頭氣管粘膜，腺胃粘膜，盲腸扁桃體，直腸及洩殖腔等處粘膜出血。
(3)EDS-76與脂肪肝綜合癥的區別：脂肪肝綜合癥是雞的一種代謝病，以肝異常脂肪變性，產蛋突然下降，雞冠蒼白，死亡率高。主要發生在肥胖雞。死雞剖檢發現肝腫大，易碎，呈黃褐色，肝破裂出血。
(4)EDS-76與鈣、磷、維生素A，D缺乏癥的區別：鈣、磷、維生素A.D缺乏癥也引起產蛋下降，產無殼蛋，軟殼蛋，早產。卵殼腺機能不正常，因而不能分泌充足的殼質而產殼蛋，當飼料中加入添加劑鈣磷和維生素A.D後，就很快恢復。
(5)EDS-76與雞新城疫(ND)，雞傳染性支氣管炎(IB)，雞腦脊髓炎(AE)等能引起產蛋下降疾病的產蛋曲線比較如圖1。
六、防制
本病目前尚無有效的治療藥物的方法，故防制上仍然實行"以防為主"的方針，其主要措施是"淨化、免疫、監測"。
1. 嚴格檢疫：在從國外或外地引進雞或蛋時，進行嚴格檢疫，並將雞隔離一段時間觀察，及時做到早期防制。
2. 淨化措施：當雞在40週齡以上時，如果祖代雞已有了抗體，出的蛋也正常了，此時取蛋孵雛，將雛雞分成若干組，間隔6週測定HI抗體，淘汰陽性組。當這一世代的雞達到40週齡時，從陰性組收集下一世代種蛋，直到達到清除之目的。McFerran J.B.等建議，應長期進行血清學檢查，用HI試驗對雞群進行感染有無的監測，撲殺陽性雞，長期堅持，方能達到淨化之目的。
3. 免疫接種：免疫接種是本病的主要預防措施。本病最早在歐洲大流行時，曾在消滅病毒中加入油類佐劑製成了BC14疫苗或用鴨胚細胞苗，接種收到了滿意效果。現在應用較多的單苗中，也是 BC14毒株油劑甲醛苗，該苗接種18週齡後的母雞，經肌肉或皮下接種0.5ml，15天後產生免疫力，抗體可維持12~16週，以後開始下降，40~50週抗體消失。在匈牙利採用的是B8／78株病毒製備的滅活苗，免疫後3週，95％的免疫雞HI抗體可達最高峰。
在雙價苗研製中，採用了EDS-76病毒127株和雞新城疫消滅活二聯油佐劑苗的研製，已取得了較好的效果。譬如Bouquet等用127株細胞培養物和新城疫病毒株的雞胚尿囊液，經β-丙酸內酯滅活後製成，對17~18週齡雞接種表明，該苗有較好的保護作用和安全性。Zanella A. 研製的二聯滅活苗，接種16~20週齡的蛋用雞，其雞新城疫和EDS-76的HI抗體滴度可達27至210，至少在一年內可抵抗這兩種強毒的攻擊。
國外已有人研製出了ND-EDS-76-IBD(雞新城疫一減蛋綜合癥─傳染性法氏囊病)三聯滅活疫苗，取得了明顯效果，並且互相間不產生免疫干擾產蛋雞能產生堅強的免疫效果，免疫期在6個月以上，必要時可重複接種免處。
4. 控制措施：
當發生EDS-76時，雖然目前尚無有效的治療辦法，但可用EDS-76高免蛋黃注射液，給病雞每只肌肉注射或皮下注射2毫升，同時配合補充維生素、鈣、糖水等，改善營養條件，有一定的治療效果，尤其早期使用，效果更佳。目前有的雞場採取下列綜合措施，收到了一定效果。
(1)對21~35週齡蛋雞，可用飼料中添加土霉素和𧪄喃唑酮，防止產蛋量下降。預防量：每噸飼料中加土霉素50~75克，𧪄喃唑酮50~75克。治療量：每噸飼料添加土霉素200克，𧪄喃唑酮200克。
(2)加大飼料中維生素與微量元素比例，每隔1週，增大1倍，可提高孵化率及雛雞成活率。
(3)提高飼料質量，蛋白質要保持在18~19％，並提高賴氨酸，蛋氨酸和胱氨酸的比例；提高膽鹼，VitB12，Vit E的水平，以保護肝臟。滿足雞對鈣的需要量，將其中30％的貝殼，以顆粒形式飼餵。
(參考文獻二十二篇從略)
飼料營養雜誌(p.15∼22)─戴卓見、九四年第五期