技术服务资料-测定赛得福(Ceftiofur)及其它12种抗生素对引起猪呼吸道病变细菌之最低制菌浓度

摘   要

        本实验主要在测定赛得福钠(Ceftiofur Sodium)及其它12种具竞争性抗生物质(ampicillin penicillin G,gentamicin,sulfamethazine,tetracycline,erythromycin,tylosin,streptomvcin,Ciprofloxacin,enrofloxacin,lincomycin,and pirlimycin),对分属3属、6种之31株病原菌的最低制菌浓度(Minimal inhibitory concentration, MIC)。这些菌株乃由未经投药处理之病畜所分离出,以评估投与赛得福(Ceftiofur)後,後猪呼吸道疾病之防治效果。

        结果以赛得福(Ceftiofur)及其它β-丙醯胺类化合物(β-lactam Compounds)对链球菌属(Streptococci)之制菌效果最佳(MIC50=≤.06μg/ml),而赛得福(Ceftiofur)之效果又於同属鶦鶳类化合物(Quinolone)的Ciprofloxcin及enrofloxacin(MIC50=0.13-0.5μg/ml,依菌株而异)。百果霉素(Pirlimycin)对此类革兰氏阳性菌G(+)的制菌效果则次之(MIC50=≤.06-0.25μg/ml,依菌株而异)。而streptomycin、Sulfamethaxime、tetracycline、Erythromycin及tylosin等行之多年的抗生素则对这些分离出来的链球菌属已普遍具有耐药性,故制菌效果平平。在控制败血性巴斯德杆菌(Pasteurella multocida)A型及D型上,赛得福(Ceftiofur)、ciprofloxacin、enrofloxacin仍是13种试验药品中效果最佳者(MIC90=<.06μg/mla,而strepomycin、sulfamethazine、tetracydine及tylosin仍因耐药性问题,致效果不显着。lincosamides则如原先所预料,对同属革兰式阴性菌的巴斯德杆菌(Pasturella)及博德氏菌属(Bordetella spp.)。仅鶦鶳类抗生素(quinolones)、Gentamicin及tetracycline对B. brochiseptica的二种菌株有制菌效果。

        依此结果,再综合以往所做有关防治放射杆菌性胸膜肺炎(Actinobacillus pleuropeumoniae)之抗生素活性测定试验,可知,赛得福(Ceftiofur)对各类会引起猪呼吸道疾病之病原菌有相当好的制菌效果。

介   绍

        赛得福钠盐(Ceftiofur Sodium)是一种具广效抗菌谱的头孢子素类抗生素(Cephalosporin antibiotic),在兽医学上,已被证实对许多好气性菌及厌气性菌有相当理想的制菌效果(1);最近,此类抗生素开始被推广於防治猪的呼吸道疾病上,目前已在世界各地进行研究,以评估赛得福(Ceftiofur)对自然感染的猪呼吸道疾病之疗效(2),这些试验用菌株,乃由爱荷华州立大学病理诊断实验室,在未经投药处理病畜之肺及气管组织中所分离出,然後於普强公司实验室进行MIC值测定。本实验所使用的试药,均是市场上相当重要的竞争产品。

材料和方法

试   药:

        Ceftiofur Sodium

        Ampicillin Sodium

        Penicillin G Sodium

        Gentamycin Sulfate

        Sulfamethazine

        Tetracycline hydrochloride

        Erythromycin

        Streptomycin Sulfate

        TylosineTartrate

        Ciprofloxacin hydrochloride

        monohydrate

        Enrofloxacin

        Lincomycin hydrochloride

        Pirlimycin hydrochloride

        所有试药均溶解并稀释於无菌水中。浓度均以自由基或酸当量活性(acid equivalent activity)之型态表示。

步   骤:

        本实验步骤乃依前述之琼脂稀释法(Agar dilution method)以测定最低制菌浓度(MIC)(4)。

菌   株:

        试验的菌株及其来源如表一。这些菌株乃在爱荷华州立大学病理诊疗实验室,由劳伦、赫夫曼博士(Dr. Lorraine Hoffman)指导下,将未经投药处理猪群於被饲养的第七天解剖,由其肺及气管组织中分离出(2)。这些将作为测定MIC值用之菌株,则如以往之方法分别予以保存及接种(1)。

表一   菌             株             及             其             来             源

菌           株

猪           只 来                     源 鉴                           定
S89-1

S89-2

S89-3

S89-4

S89-7a

S89-9

S89-10

S89-11

S89-12

S89-13

S89-14

S89-15

S89-16

S89-17

S89-17(2)

S89-18

S89-19

S89-20

S89-21

S89-23

S89-25

S89-26

S89-29

S89-30

S89-31

S89-32

S89-33

S89-34

S89-35

S89-36

S89-37

149

120

159

61

109

54

98

149

121

3

35

7

125

121

3

64

96

1

94

33

47

4

58

150

136

105

4

150

25

87

25

Yeske (11794)

Yeske (11794)

Yeske (11794)

Yeske (11794)

Graham (12138)

Waddell (13933)

Waddell (13933)

Waddell (13933)

Waddell (13933)

Waddell (13933)

Waddell (13933)

Waddell (13933)

Waddell (13933)

Waddell (13933)

Waddell (13933)

Kueker (15143)

Kueker (15143)

Kueker (15143)

Kueker (15143)

Kueker (15143)

Kueker (15143)

Yeske (16322)

Yeske (16322)

Yeske (16322)

Yeske (16322)

Yeske (16322)

Yeske (16322)

Yeske (16322)

Yeske (16322)

Yeske (16322)

Yeske (16322)

Streptococcussuis*

S. suis 1,2

α-streptococcus

S. suis 4

Pasteurella multocida A

S. suis*

S. suis*

P. multocida D

P. multocida D

S. suis 8

Bordetella bronchiseptica

S. equisimilis

S. equisimilis

S. uberis

B. bronchiseptica

P. multocida A

P. multocida A

P. multocida A

P. multocida A

P. multocida A

P. multocida A

S. suis*

S. equisimilis

S. equisimilis

S. equisimilis

S. equisimilis

S. equisimilis

S. suis

P. multocida A

P. multocida A

S. equisimilis

*类型未确认。

a.菌株所编乃连续号码,但有部分因菌株无法生长或受严重污染,无法使用,而未予编列。

结果与讨论

        赛得福(Ceftiofur)及其它12种具竞争性抗生素对自猪所分离出呼吸道疾病之细菌性病原所作的最低制菌浓度(MIC)试验结果,概述於表2及表3。各试药对个别菌株之MIC值则列於表4及表5。

表二 抗 生 素 对 链 球 菌 属 菌 株 之 最 低 制 菌 浓 度 (MIC,μg/ml)
抗    生    素 S. suis (8) S. equisimilis (8) 其他菌种(2)
范       围 MIC50a 范      围 MIC50 范      围 MIC50
Ceftiofur

Ampicillin

Penicillin

Gentamicin

Streptomycin

Sulfamethazine

Tetracycline

Erythromycin

Tylosin

Ciprofloxacin

Enrofloxacin

Lincomycin

Pirlimycin

.06b

≤.06-.25

≤.06-.5

.25-1

.25->128

64-256

8->128

≤.06->128

≤.06->128

.25-2

.13-5

.13-16

≤.06-.25

≤.06

≤.06

≤.06

.25

8

128

16

.13

1

.5

.5

2

.25

≤.06

≤.06

≤.06

1

64

128

16

≤.06-4

≤.06->128

≤.06-.13

.13-.5

.13-2

≤.06-.25

≤.06

≤.06

≤.06

1

64

128

16

≤.06

8

.13

.25

.5

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06-.25

.5-1

8-16

256

2-32

≤.06-.25

>128

.13

.25-5

2-16

≤.06-.25

… C

 

表三 各种抗生素对革兰式阳性菌菌株之最低制菌浓度(μg/ml)
抗    生    素 P. multocida (11) B. bronchiseptica (2)
范       围 MIC90a 范      围 MIC90
Ceftiofur

Ampicillin

Penicillin

Gentamicin

Streptomycin

Sulfamethazine

Tetracycline

Erythromycin

Tylosin

Ciprofloxacin

Enrofloxacin

Lincomycin

Pirlimycin

≤.06-.5

.13-5

≤.06-.5

≤.06-1

.25-128

8-256

.25-16

.25-2

16-32

≤.06b

≤.06

.25-16

≤.06-32

≤.06

.25

≤.06

1

16

256

16

2

32

≤.06

≤.06

16

32

128

4-32

128

2

>128

>512

.5

8-16

>128

.25-1

.25-1

4-64

1->128

… C
注:a.在最低制菌浓度内被有效抑制的菌株比例。

  b.在「范围」一栏内若只有一个数字,表示所有的菌株皆在此一浓度下被有效抑制。

  c.试验菌株过少,数据不予采用。

 

表四 赛 得 福 (Ceftiofur) 与 其 它 抗 生 素 , 对 各 链 球 菌 株 之 最 低 制 菌 浓 度 (MIC) 比 较
菌    株 各           试           药           之           最           低           制           菌           浓           度   ( MIC  ( μg / ml )
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
S89-1a

S89-2a

S89-4a

S89-9a

S89-10a

S89-13a

S89-26a

S89-34a

S89-15b

S89-16b

S89-29b

S89-30b

S89-31b

S89-32b

S89-33b

S89-37b

S89-3c

S89-17d

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

.25

.25

.25

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

.25

.5

.13

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

.25

≤.06

.25

.25

1

.25

.25

.13

.25

.5

1

1

1

1

1

1

1

1

.5

1

64

8

8

8

8

2

.25

>128

64

64

64

64

64

64

64

64

8

16

128

128

128

128

128

256

64

256

128

128

128

128

128

128

128

128

256

256

16

16

16

128

>128

>128

8

128

16

16

16

16

16

16

16

16

2

32

≤.06

≤.06

≤.06

.13

.25

.13

.13

>128

4

4

≤.06

4

2

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

.25

≤.06

≤.06

32

.1

1

2

≤.06

>128

>128

>128

8

>128

64

.25

.25

≤.06

>128

>128

.25

.25

.25

2

2

2

1

.5 

≤.06

.13

.13

.13

.13

.13

.13

.13

.13

.13

.13

.13

.13

.5

.5

.5

.5

.5

.13

.25

.25

.5

.25

.5

.25

.13

.25

.5

4

.13

2

2

2

2

16

2

.25

2

1

2

2

.13

.13

.5

16

2

.25

≤.06

.25

.13

.25

.25

.25

.25

≤.06

.25

≤.06

.25

.25

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

.25

1:ceftiofur;2:ampicillin;3:penicillin;4:gentamicin;5:streptomycin;6:sulfamethazine;7:tetracycline;8:erythromycin;9:tylosin;10:ciprofloxacin;11:enrofloxacin;12:lincomycin;13:pirlimycin.

a. S. suis

b. S. equisimilis

c. astreptococcus

d. S. uberis

 

表五 赛 得 福 (Ceftiofur) 与 其 它 抗 生 素 , 对 格 兰 氏 阴 性 菌 菌 株 之 最 低 制 菌 浓 度 (MIC) 比 较
Strain 各           试           药           之           最           低           制           菌           浓           度   ( MIC  ( μg / ml )
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
S89-7a

S89-11a

S89-12a

S89-18a

S89-19a

S89-20a

S89-21a

S89-23a

S89-25a

S89-35a

S89-36a

S89-14b

S89-17b

≤.06

≤.06

.5

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

128

>128

.13

.13

.5

.13

.13

.13

.25

.25

.25

.25

.25

32

4

≤.06

≤.06

.5

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

128

128

5

.25

≤.06

1

1

1

1

1

1

1

1

2

2

8

8

128

.25

16

16

16

16

16

>128

6

128

>128

64

32

8

64

256

256

256

256

256

256

256

>512

>512

.6

.25

8

.5

16

16

16

16

16

8

1

.5

.5

2

2

.25

.25

2

2

2

2

2

2

2

16

8

16

16

8

16

16

16

16

16

16

32

32

>128

>128

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

1

.25

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

≤.06

1

.25

.25

.5

2

.25

.25

.25

16

16

16

16

16

64

4

.13

.5

10

.5

.13

≤.06

32

32

32

32

32

>128

1

1:ceftiofur;2:ampicillin;3:penicillin;4:gentamicin;5:streptomycin;6:sulfamethazine;7:tetracycline;8:erythromycin;9:tylosin;10:ciprofloxacin;11:enrofloxacin;12:lincomycin;13:pirlimycin.

a. P. multocida

b. B. bronchiseptica

        由表可知,赛得福及其他β-内盐胺类化合物对链球菌属之制菌效果最佳,而赛得福(Ceftiofur)之效果又优於同属鶦鶳类化合物(quinolone)的ciprofloxacin及enrofloxacin。百里霉素(Pirlimycin)对此类革兰式阳性菌的制菌效果则次之。而Streptomycin、Sulfamethazine、tetracycline及tylosin等行之多年的抗生素、则因对链球菌属已普遍具有耐药性,致制菌效果平平。在控制败血性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)A型及D型上,赛得福(Ceftiofur)、ciprofloxacin及enrofloxacin是 13种试验药品中效果最佳者。而treptomycin、Sulfamethazine、tetracycline及tylosine仍亦因耐药性问题,致效果不显着。lincosamides则如原先所预料,对同属革兰氏阴性菌的巴氏杆菌属(Pasturella)及博德氏菌属(Bordetela spp.)无效,仅鶦鶳类抗生素(quinolones)、Gentamicin及tetracycline对B. bronchiseptica的两种菌株有效果。

        依本文结果,再综合以往所做有关防治放射杆菌性胸膜肺炎(Actinobacillus pleuropneumoniae)用抗生素活性测定试验结果,可知,赛得福(Ceftiofur)对各种引起猪呼吸道疾病之病原菌有相当好的制菌效果,此已由近期对1762头猪只所作的实验中得到证明(2)。

参考文献

        1.Yancey, RJ Jr, MLKinney, BJRoberts, KRGoodenough,JCHamel, and CWFord. 1987. Ceftiofur sodium, a broad-spectrum cephalosporin:evaluation in vitro and in vivo in mice. Am. J. Vet. Res. 48:1050-1053.

        2.Luchsinger, JH, JBPaulissen, and KJDame, 1989. Effect of ceftiofur sodium sterile powder for treatment of naturally occurring swine respiratory disease. Upjohn Technical Report# 796-9690-89-001.

        3.IOM, RAEvans to RJYancey entitled " MIC comparisons", dated 8 August, 1989.

        4.Klien, LK, KRGoodenough, BJKoberts, and RJYancey, Jr. 1985. ln vitro and in vivo evaluation of habekacin against veterinary bacterial pathogens. Upjohn Technical Report # 705-7922-85-012.

                                                             饲料营养杂志(60~67)-普强药厂.九一年九期

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