霉菌毒素：来源、影响及

如何以普通方法来控制和去除

一、霉菌毒素之起源

        霉菌毒素是由霉类所产生之次级代谢产物，它广泛存在於农业产品中，包括谷类、核桃类、黄豆和其他农业产品；某些霉类所产生之毒素能污染上述农业产物，进而影响到吃这些农产物的人类和动物。更甚的是当家畜给予某一霉菌毒素所污染的饲料，它本身虽然耐过，但这些毒素会转入肉、乳、蛋等禽畜产品中，由食物安全之观念来看此现象变得相当值得注意。

        黄麴毒素被认为是热带和亚热带所注意的问题，产生黄麴毒素之蕈类主要为黄麴菌和寄生麴菌，这些菌可以在谷类、油仔类、核桃类、花生和乾无花果上。由於黄麴毒素对人体健康有严重的不良影响，因此美国食品药物局(FDA)规定人吃的食物中不可以超过每公斤20微克，然而消费者及世界出口市场上认为食物中黄麴毒素应该是零污染。在寒或温带地区，例如美国和美国北部之本地作物中，并没有发现黄麴毒素。就经济而言，此地区最重要之霉菌毒素是deoxynivalenol、F2毒素(zearalenone)、赭麴毒素A(ochratoxin)、diacetoxyscirpenol、T2毒素、HT2毒素。最近发现Fumonisins，特别是B1型之发生有特殊的地域性，这些毒素发生的范围很广，由小型谷物和玉米到香蕉都有。

        作物和动物生产者、食品和饲料加工者和全国之经济均可感受到霉菌和其毒素所导致经济上的影响(Charmley et al., 1994)。这些影响包含减少作物和动物生产者之利润，其漫延及污染之程度造成加拿大百万元以上的损失(Trenholm et al., 1985b)。

影响和重要性：毒物学观点

        霉菌毒素造成很广的不良临床症状，其程度依动物摄取饲料中所含毒素之特性，浓度、摄取时间的长短、动物之种类、年龄、营养状况及健康情形而定(Prelusdy et al., 1994)，明显的中毒发病和死亡率并不常发生，导致最多之经济损失是由於非特定之影响使得成绩减低及疾病发生增加所引起(Thompson，1991)。

二、霉菌毒素对动物之毒物影响

        (一)黄麴毒素

        黄麴毒素是所有霉菌毒素中被研究最多之一种，无数综论文章讨论黄麴毒素对动物之影响(Bryden，1982；Norred，1986)，主要之影响包括对肝之损伤，对生产力之影响(包括减低生长率和产乳量)，对蛋壳品质和屠体之影响，降低免疫力及致癌。黄麴毒素M1(黄麴毒素B1代谢产物)到牛乳中对健康有严重之影响，因此美国食品药物管理局规定黄麴毒素M1在牛乳中之浓度不可超过0.5微克／公斤，然而在欧洲规定在牛乳中黄麴毒素M1浓度不可超过0.05微克／公斤(Van Egmond，1993)。

        黄麴毒素对家禽业者(Boutrif in press)，养猪业者(Nichols，1983)和一些养牛业者(McKenzie et al., 1981)造成严重的经济上之影响。家禽对黄麴毒素之不良影响极度敏感，每公斤饲料含有0.2毫克量，就足以造成摄食量和每日增重下降(Johri和Sadagopan，1989)，虽然牛对饲料中黄麴毒素的耐受力比家禽大的多，但仍然有一些报告指出在澳洲有一些单独之例子，显示养牛场因黄麴毒素而受到严重之损失。

        Deoxynivalenol

        这是一种trichothecene霉菌毒素由梭菌属之霉菌所产生，就猪而言，当这种毒素量增加时，可导致摄食量下降，当毒素量再增加时，猪会拒食同时呕吐(Pier，1981；Young et al，1983；Lun et al，1985；Trenholm et al，1988)，并使得猪增重和体重减低，会造成免疫力低下及影响繁殖(Reotutar，1989)，家禽(Moran et al，1987)、牛(Trenholm et al，1985a；Cote et al，1986；8 Charmley et al，1988)和羊(Harvey et al，1985a；Prelusdy et al，1987)均较猪对此毒素之耐受力强。此毒素很少会传入蛋、组织或牛乳中。

        T2毒素HT-2毒素和diacetoxyscirpenol

        这些trichothecene毒素毒性更强，但还好它们分布不广且较deoxynivalenol少。喂饲料中含有少到中等量(1到8毫克／公斤)之T-2毒素就会造成显着的减少猪只摄食量和增重，当此毒素在饲料中含量高时(10到12毫克／公斤)显着的造成增重，血中化学成份及繁殖性能不良之影响(Harvey et al，1990)，实验结果中显示T-2毒素导致不孕，每胎头数减少、猪小、流产(Weaver et al，1978b)。同时T-2中毒或／和diacetoxyscirpenol中毒可导致口损伤(Weaver et al，1978a，1981)。T-2毒素可使得家禽减少摄食量、产蛋量、蛋壳厚度和孵化率变差(James 1987)。在自然情形下发霉饲料混合毒素污染会造成比单一毒素更严重的不良影响(Mannion and Blaney，1988；Kubena et al，1989)。牛对T-2毒素较敏感(Hsu et al，1972)在现场发现严重危害健康之病例，不幸的是饲料未送去化验证实是否为T-2毒素(Petrie et al，1977)。

        F-2毒素(Zearalenone)

        猪(特别是年轻女猪)对饲料中之F-2毒素特别敏感(James and Smith，1982；Kuiper-Goodman et al，1987；Friend and Trenholm，1988)仅每公斤饲料中含1-3毫克就造成生殖功能不正常和阴户肿大之症状，仅低量就可造成此症状(Friend et al，1990)女猪摄取5-6毫克／公斤之饲料时可造成严重的配种问题，临床症状包括阴户红肿、乳房肿胀、卵巢肿胀、怀孕失败、胎儿死亡及无乳症。极端例子导致阴道和直肠脱。此毒素可。极端例子导致阴道和直肠脱。此毒素可导致小公猪(Ruhr，1979)及公猪(Young and King，1986)不良之影响。(Mirocha et al，1968；Kallela and Ettala，1984)。在牛羊吃下F-2毒素後之症状包含：不休息、下痢、乳房肿大、乳产量减低、阴户排出恶露、不断发情、不孕、流产、阴道炎、乳房发育早熟、女牛发情前之不孕，在自然情况下对牛繁殖和不孕最戏剧性之影响是F-2毒素和其他毒素合并影响所导致之结果(Schuh and Baumgartner，1988；Coppock et al，1990)。

        家禽对F-2毒素有很大之抗力，只有在饲料中含量非常高时，才有影响(800到几千毫克於F-2毒素／公斤)(Chi et al，1980a；Allen et al，1981)。

        Fumonisins

        Fumonisins是最近才发现之霉菌毒素，主要由Fusarium moniliforme所产生。目前对此毒素所造成之问题尚不清楚，但Fusarium moniliforme却是在世界上污染一些谷类和玉米最普遍之毒素，也因为如此，fumonisins在对人和动物健康及对食物和饲料安全上被人们考虑为主要之问题(Kellerman et al，1990；Wilson et al，1990)。Fumonisins特别是其B1毒素，已被认为可造成一些临床症状，例如马之脑白质软化病(ELEM)，猪的肺肿胀(PPE)(Colvin and Harrison，1992；Haschek，1992)，或鸡之毒饲料症，ELEM症是牛致命之病，伤到脑部有时也伤到肝和肾(Haliburton and Buck，1986；Marasas et al，1988b；Kellerman et al，1990；Wilson et al，1990，1991)，PPE则在此时毒素低污染情况下，会使猪临床上有病现象及肝受损，高剂量污染则会导致肺肿大而快速致死(Colvin and Harrison，1992；Haschek，1992)。

        饲料中含B1毒素10-25毫克／公斤鸡才会产生毒饲料症。临床症状是脚颈伸开，运动失调、瘫痪、摇晃、呼吸困难、气喘、生长缓慢，高浓度的Fumonisins在中国和南非可导致食道癌(Yang，1980；Marasas et al，1988a)，虽然此毒素可导致老鼠产生癌症，但导致因素方面仍需证明。

        赭麴毒素A

        赭麴毒素A是一种肾毒毒素，主要是由麴菌属和青霉菌属霉菌所产生。在北美和部分欧洲均发现有此毒素污染的谷类。给予猪鸡天然的此毒素(2毫克／公斤或更少)会有不良反应，在猪之反应包括影响到肝和肾之功能(Elling et al，1985；Carlton and Tuite，1986)某些状况下临床症状不易分辨(Mortensen et al，1983；Lippold et al，1987)受慢性赭麴毒素A影响有时只有在尸解剖看肾时才能找到证据。对肾所造成之未表现像包括肾肿、色泽减轻、组织学上之不正常(Golinski et al，1984；Tapia and Seawright，1985；Cooket al，1986)，这种症状可以在每公斤饲料中仅含有0.2毫克Ochratoxin A时就会出现(Krough et al，1974)，当饲料中此毒素浓度增育时(2毫克／公斤或更多)，减低成绩和增重(Huff et al，1980；Tapia and Seawright，1985；Harvey et al，1989)同时肝和膀胱受损。

        就家禽而言，低浓度(2毫克／公斤饲料)的赭麴毒素A可使增重，饲料利用效率、产蛋(Dwivedi and Burns，1984；Gibson et al，1989；Rotter et al，1990)均受到不良影响。高浓度时(4毫克／公斤饲料)增加鸡只死亡率(Jayakumar et al，1988；Sreemannarayana et al，1989；Gibson et al，1989，1990)、骨骼之异常(Duff et al，1987)，禽类神经病理症状。及可能导致其他器官组织受损(Jayakumar et al，1988；Gibsonet al，1989；Sreemannarayana et al，1989)，此毒素A同时可导致免疫力低下，因之，此病毒可导致养鸡业重大损失。火鸡比肉鸡受此影响更严重(Burditt et al，1984)。

        至於反刍兽对赭麴毒素A的耐受性相对的较高。文献中有关牛羊中赭麴毒素A毒之例子很少。可能是此毒素可被瘤胃菌丛有效水解酵素成非毒性之代谢产物。然而仔牛在可以反刍前，对此毒性则相当敏感。在实验室中可以加很高量(800毫克／公斤)可使牛中此毒素之毒。中毒时之症状包括增重减低、下痢、产乳量下降、肝、肾受损，肾受损导致脱水以及致死(Pier et al，1976；Lloyd，1980；Chu，1984)。当这些具有耐受性的动物吃了这种毒素污染之饲料後，此种毒素可由牛乳、肉中影响到人的健康及食物之安全性。

三、除霉菌毒素之一般方法

        农业界里预路方霉菌毒素之污染是非常的重要，然而在某些温度和湿度下，污染是不易预防，而且在某些季节里问题相当广，策略性减少霉菌毒素之影响，包含育出抗霉的植物品种(Snijders，1994)，有效的收成和储存方式可减少污染，以及发展出一些商业可用之技术来减少污染。很多种去污法都被试用过(Charmley and Prelusky，1994)。这些方法可大分为物理、化学和生物法。某些方法被证明相当成功，有些则否；有些成功的方法又被认为很难用於商业上之现场。

        (一)物理方法

        物理方法包括清洗、去壳、去皮，将有无毒和没污染的分成两类，或由加热来处理。这些处理方法之成功与否又和这些谷物到手时，污染的程度和分布之多广有关。清洗法包含筛滤法、清洗和除去灰尘残渣、小的碎粒、残屑、去壳、精制。以水或碳酸钠溶液洗清，此种清洗可清除7-100％的deoxynivalenol，F2毒素或nivalenol的浓度清洗可以去除一部份表层之污染，但清洗後又将花很多费用来使谷类乾燥。在某些清洗的例子中，虽然清洗、去除了一些deoxynivalenol，但是猪只喂饲此谷类时，并没有减少猪只中毒之情形(Patterson and Young 1992b，1993)deoxynivalenol在制作的小麦碎料中是依它穿透於小麦胚乳中之量的多少而定。例如在制粉过程中有时去除了很多(15-100％)小麦粉中的deoxynivalenol、F2毒素和nivalenol的浓度(Young et al，1984；Seitz et al，1985；Tanaka et al，1986)，但有些例子中deoxynivalenol似乎在粉中分布的非常均匀(Hart and Braselton，1983；Scott et al，1983；Seitz et al，1986)在残渣中含量似乎高一些。

        某些例子中，发霉和受霉菌毒素污染的谷物在物理特性上和正常谷物不太一样，可以密度法在液体中依比重不同分离。小麦、玉米或高粱去除碎粒置於水和50％的蔗糖溶液(Huff and Hagler 1985)或水和饱和的盐水溶液中(Babadoost et al，1987)，可使得deoxynivalenol或deoxynivalenol和zearalenone的浓度减少40-100％。在花生工厂中常以物理法将黄麴毒素污染的部份分离，此种分离一般是以手来分或以电子仪器来分离有污染的部份(Dickens and Whittaker，1975)，以电子法去除黄麴毒素污染之花生其去除中可达平均70％，用手去捡离去除效率不高，不但耗时商业上并不适合，因为可能会丢掉正常之花生或无法去除以肉眼无法辨识有污染的花生，以密度法去除黄麴毒素污染的花生是另一种去除污染毒素之方法，此法有时损失较大。在花生的密度和黄麴毒素浓度之间存有负的相关(Gnanesekharan and Chinnan，1992)，黄麴毒素含量高的其密度显着的低，当然有时低密度之花生可能是正常花生，因此以密度法分离会分出一部份正常之花生。以水将污染之花生由正常花生中分离的办法已获得美国专利，但还没有广泛被采用，因分离後之好花还需经过耗钱之乾燥过程。曾试着以密度法来分离黄麴毒素污染之玉米和棉花子粕密度分离法，以过氧化氢法来分离受黄麴毒素污染之花生也很有效。但污染以不超过200微克／公斤，且处理条件要相当严格(即过氧化氢浓度和作用时间要够，因此此法并不有效率(Clovero et al，1993)。

        霉菌毒素可以采热处理法来破坏，烘焙点心，有deoxynivalenol污染面粉所制成之无酵母之甜饼(Young et al，1989)和面包(Seilz et al，1986)可去除20-40％之毒素浓度，但也有一些例子在烘焙高污染之面粉所制成之面包(Scott et al，1983，1984；Seitz et al，1986；Boyacioglu et al，1993)。小饼和甜圈圈(Scott et al，1984)，海绵蛋糕(Tanaka et al，1986)和埃及式面包仅能除去很少之deoxynivalenol毒素。

        玉米中所含之deoxynivalenol浓度可以高压消毒法(Young et al，1987)微波炉加热法(Young et al，1986；Stahr et al，1987)和一般高温烘箱(Young et al，1986)处理後而减少。烘烤可以减少小麦中此毒素之浓度(Stahr et al，1987)，微波炉可以减少玉米中之T-2毒素之浓度(Stahr et al，1987)火焰烘烤可减少霉菌48-98％，但无法显着减少其中之deoxynivalenol和F-2毒素之浓度。

        紫外线减少无花果黄麴毒素之浓度(Altug et al，1990)可减少黄麴毒素M在乳中之量(Yousef and Marth，1986)，过氧化氢可以增加除毒之效果。

       (二)化学方式

        虽然试过无数种化学物质来减少不同种谷物、谷物产品霉菌毒素之量，但仅有少数产品有效，而其中仅有几种具有商业化之效果。发现对抗霉菌毒素有效之化学药品中包括Calcium hydroxide monomethylamine对污染玉米中之T2毒素diacetoxyscirpenol和F2毒素有效(Bauer et al，1987)。酸性亚硫酸钠(Sodium bisulfite)可除去被deoxynivalenol(Swanson et al，1984；Young et al，1987；Boyacioglu et al，1993)黄麴毒素(Moerk et al，1980)污染的玉米中之毒素量，黄麴毒素污染之无花果。湿或乾的臭氧、氯气和氨气可以去除玉米中之deoxynivalenol，氯气可以除去椰子粕中之黄麴毒素中之B1毒素(Samarajeewa et al，1991)，过氧化氢、维生素C、氢氧化氨、盐酸、二氧化硫气体可减少小麦中污染之deoxynivalenol(Young et al，1987)，甲醛、氢氧化氨可减少玉米粒及自然玉米中污染之F2毒素量。氨气可以减少谷类中赭毒素A污染之量及黄麴毒素污染之花生饼(Frayssinet and Lafarge-Frayssinet，1990)和玉米之量(Moerk et al，1980；Hammond，1991)，氨气可以减少玉米、花生饼、全棉子和棉子产物中黄麴毒素浓度99％，如能将作用时间加长则此除毒作用是不可逆的。以氨气处理黄毒素污染之棉子粕在美国亚利桑纳州、加州、德州(Park et al，1988；Price et al，1993)已证实在商业上可用，在法国也已证实可用，在美国德州证实用在玉米上可用(Park，1993；Price et al，1993)因为此法有效不贵，在农场采用它也不贵，且此法可能为美国食品药物局所通过使用在州和州之间运输时使用。在饲喂实验上也没有显示，经氨气处理之饲料有毒。在亚利桑那州使用氨气处理之棉子粕喂牛使得牛场可供应无黄麴毒素M1污染之牛奶。

        在某些情况下，物理法和化学法并用，可达到更好之除污染之效果。化学处理可因加热增加效果，例如甲醛在处理玉米中F2毒素，又如Calcium hydroxide monomethylamine可处理玉米粉中之T2毒素、diacetoxyscirpenol和F2毒素时，亚硫酸钠在处理玉米中之deoxynivalenol毒素(Young et al，1987)和无花果中之黄麴毒素。热加上石灰石水一起处理时可减少玉米之deoxynivalenol，F-2毒素和15 acetyl deoxynivalenol之浓度。热和氢氧化钠一起中可减少谷类中赭麴毒素，氨气和热及加压处理时可减少玉米中fumonisin之浓度。(Park et al，1992)。

        (三)生物处理法

        减少霉菌毒素污染谷物之另一方法是改变饲料，减少其毒性，这方法包括以正常谷物稀释污染之谷物，增加谷物之营养份含量，添加防霉剂、除霉味剂，加入霉菌毒素吸附剂以减少肠道内吸收之毒素及一些其他方法，稀释法是最有效且广为采用之方法，可减少霉菌污染的饲料影响到动物之量，特别是因Fusarium污染饲料情况下可改善摄食量和增重，然而此法之成败决定於原污染量之大小、稀释方式、稀释原料之来源、添加防霉剂(McNear et al，1981；Foster et al，1987)和香味剂(McNear et al，1981)对已发霉玉米之不良影响并不能改善。如果丙酸氨用於防霉时可改善吃没有污染及已被污染饲料之猪的生长效率(Foster et al，1987)。如果摄食量因为毒素污染降低20％或较少，则增加饲料之能量粗蛋白质、矿物质和维生素可改善因毒素污染饲料之增重20％。一些霉菌毒素吸附剂之效果有限，依毒素种类而有所差异(表2)这些吸附剂包括苜蓿粉、合成之阴离子交换沸石、水合矽酸盐(HSCAS)和酵母细胞壁之产物。苜蓿可克服饲料中含有高量F2毒素(Smith，1980a；James and Smith，1982；Stangroom and Smith，1984)和T2毒素(Carson 1983b)所造成老鼠之不良影响。但苜蓿对於每公斤饲料含有50毫克F2毒素所造成之女猪子宫肿大并没有改善之效果(Smith 1980a)饲料中含有10毫克F2毒素时，喂苜蓿给女猪有稍许之改善效果。合成之阴离子交换沸石，可以减轻小鼠受到F2毒素之影响(Smith，1980b)。水合矽酸盐和菜子油、漂白黏土可以克服相当大T2毒素所造成对老鼠不良影响(Carson and Smith 1983；Smith，1984)，水合矽酸钠(Volclay powder and FD181)可改善饲喂含有黄麴毒素猪只之增重、摄食量及减轻临床症状(Lindermann et al，1993)活性碳可减少赭麴毒素A的吸收，可有效的防止小鼠T-2的中毒(Bratich et al，1990)。在一些情况下，家禽饲喂黄麴毒素污染饲料仍可增重和摄食量(Dalvi and Ademoyero，1984；Dalvi and McGowan，1984)。活性碳无法防止饲料中含有百分之5或7.5毫克黄麴毒素所导致之问题。

        老鼠喂饲赭麴毒素A污染之饲料时加Cholestyramine可减少血中、尿和粪中之此毒素之含量(Madyastha et al，1992)。Cholestyramine可减少赭麴毒素A的生物有效性56％，可减少F-2毒素对老鼠所造成之动情素效果(Underhill et al，1995)，加水合矽酸钠0.5％在饲料中可显着的减少黄麴毒素B1和黄麴毒素对鸡(Phillips et al，1988；Kubena et al，1990，1993)、火鸡(Kubena et al，1991)、猪(Haydon et al，1990)和生长羊(Harvey et al，1991a)之影响，这浓度的水合矽酸钠可以减少黄麴毒素M1在牛乳之量。1％的水合矽酸钠可以改善摄取了发霉饲料含低量(0.35毫克／公斤)T2毒素，deoxynivalenol和F-2毒素时猪只之增重。然而水合矽酸钠无法改善猪只饲料利用效率，当摄取饲料中含有deoxynivalenol和Zearalenone(Orr 1987)或deoxynivalenol(Patterson and Young，1992a，1993；Trenholm et al，unpublished)。在鸡饲料中对防止diacetoxyscirpenol(Kubena et al，1993)T-2毒素(Kubena et al，1990)和fumonisin B1(Brown et al，1992)并没有效用。有关这种化合物所造成之差别结果之解释，包括吸附剂和霉菌毒素间离子之相吸及胆酸和吸附剂中之霉菌毒素在肠肝循环中形成。食物中含0.01％Saccharomyces cervisiae(一种酵母)此时如鸡摄取每公斤饲料含5毫克黄麴毒素，可以毒素之影响可减轻(Stanley et al，1993)。有关这种效果之可能机制是此种酵母可提供酵素增加饲料之利用率或此剂可 合黄麴毒素而在胃肠内除去(Cooney 1980)，最近在实验室内测定酵母培养物(Yea Sacc)和酵母细胞壁的物质(Bio Mos)来吸附F-2毒素和fumonisin。此二物质并无法和deoxynivalenol和fumonisin结合，但和Zearalenone之结合呈非线形关系(图1)，研究发现Cholestyramine比Bio Mos和Yea Sacc分别在4至6倍吸附F-2毒素之能力，但此物太贵导致无法在商业上使用。商业上对此种吸附有兴趣。可能价格合理的化合物，且能够给合多种霉菌毒素之化合物可以逐渐上市。

        将每公斤饲料约含有5毫克deoxynivalenol之发霉玉米以家禽肠道内之微生物接种可减少deoxynivalenol约55％，且部份减轻了其影响小猪在摄食和增重上之有毒效应(Pinp et al，1992；He et al，1993)。给予T-2毒素之单株抗体在实验室中可和由人的淋巴胚细胞培养出毒素对蛋白质合成之影响及减轻T-2毒素对老鼠之影响来证明(Feuerstein et al，1988)。单株抗体使得毒素由已中毒之人之B型淋巴胚细胞中溢出，而且蛋白质合成至正常。给予老鼠至死T-2毒素30分钟前给予单株抗体，造成血浆之毒素的隔断(Hunter et al，1990)，如给予35分钟後可使得组织中之毒素移回血浆中而减少了中毒的效应。

四、结论

        霉菌毒素污染作物仍不断的造成世界农业和食品工业之主要经济问题，霉菌和其毒素不仅使得作物生产量减低且品质变坏，也使得摄取了毒素之动物造成各种病症，虽然预防是很重要的，但在某些温度和湿度下污染是免不了的。因此目前商业上有效之除污方法增加。然而污染的谷物可能含有很复杂的毒素，每一种具有不同之化学特性，(包括热稳定，溶解度和可吸收的亲合力)，很难找到单一且对黄麴毒素相同有效的防止所有毒素之方法。此处理包括滤过、空气隔离、稀释污染谷类，煮，一些化学的方法及使用已商业化之吸附剂。我们对霉菌毒素之毒物学和化学和吸附一些毒素仍远超过我们所了解，然而霉菌毒素之污染作物偏布全世界，也因此提供了我们畜产界发展吸附剂之机会，以减少作物产量减低和家畜疾病。直到一种可靠价位，在商业化可应用及国际上可得到的方法，否则霉菌毒素所引起之问题仍会使得世界农业和食品业造成灾难。

表1. 用於减少饲料中毒素之物理、化学和生物方法

表2. 霉菌毒素吸附剂在不同饲料中之效果

饲料营养杂志(p.15～26)─L.L.CHARMLEY, H.L. TRENHOLM and D.B.PRELUSKY．九六年第二期

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